Impression par microcontact est largement utilisé pour les protéines et autres molécules tendance sur les surfaces de matériaux. Nous démontrons les étapes de base de ce processus, l'estampage modèles de la fibronectine sur le verre.
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Article de méthode
Impression par microcontact de protéines pour la biologie cellulaire
Dans cet article
Résumé
Résumé
Protocole
1. Préparation des solutions et des matériaux
Ces étapes doivent être réalisées plusieurs jours à l'avance.
- Lamelles de verre. Lamelles ont été nettoyés par immersion pendant 10 minutes dans une solution de détergent Linbro 7X: l'eau, mélangée à un 1: 3 et chauffée, sous agitation, jusqu'à ce qu'il dégage. Lamelles ont été rincés abondamment à l'eau déminéralisée, puis cuite au four à 450 ° C pendant 6 heures. Chargement des lamelles en racks coloration céramique (voir réactifs) ont simplifié ce processus.
- Solution de protéines pour l'estampage. Fibronectine Reconstituer en suivant les instructions des fabricants d....
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Discussion
Le processus d'impression par microcontact est conceptuellement simple et très robuste, ayant été appliqué à la structuration un large éventail de molécules sur une variété de substrats. Cependant, ce processus reste quelque chose d'un art. La géométrie spécifique de la structure à créer, protéine à motifs, le poids appliqué, et le revêtement / conditions d'emboutissage tous affecter la qualité d'emboutissage. Par exemple, trop peu de poids, appliquée à grands traits, aboutit souvent à des lacunes dans le modèle comme on peu.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n'ont rien à divulguer.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires | |
|---|---|---|---|---|
| Nettoyeur à plasma | Harrick Scientific Products, Inc. | PDC-32G | ||
| Exsiccateur | Nalge Nunc international | 5315-0150 | ||
| PBS | Réactif | Invitrogen | 10010-072 | |
| Kit de marquage des protéines | Réactif | Invitrogen | A30006 | |
| Fibronectine | Réactif | Sigma-Aldrich | F2006 | |
| Support pour coloration | Réactif | Thomas Scientific | 8542E40 | |
| Lames couvre-objets | Réactif | Fisher Scientific | 12-544-12 | |
| Sylgard 184 | Réactif | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | |
| Réseau de diffraction | Réactif | Edmund Scientific | 3040267 |
Références
- Chen, C. S. Geometric control of cell life and death. Science. 276, 1425-1425 (1997).
- Kumar, A., Whitesides, G. M. Features of Gold Having Micrometer to Centimeter Dimensions can b....
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Réimpressions et autorisations
