Détermination de la réactivité et le titre du sérum en utilisant un dosage d'hémagglutination

Résumé

Hémagglutination est une forme d'agglutination où les anticorps se lient aux globules rouges. Les globules rouges sont à la fois facilement accessibles et les résultats sont facilement observables à l'oeil nu. Cette vidéo montre les étapes nécessaires à un test d'hémagglutination, l'interprétation des résultats et de déterminer le titre.

Résumé

Hémagglutination est une forme spécifique d'agglutination et est utilisée lorsque les anticorps se lient aux globules rouges, qui agissent comme un antigène particulaire. Les globules rouges sont des cibles particulièrement utiles car elles sont facilement disponibles et d'agglutination est observable à l'oeil nu. Cette technique est couramment utilisée pour déterminer le titre d'un anticorps (Ac), pour le groupage sanguin et la quantification virale. Dans cette vidéo, les étapes impliquées dans la préparation et l'exécution d'une hémagglutination est démontré en utilisant des anticorps spécifiques à des antigènes du groupe sanguin A-ajoutée aux globules rouges (Revercells). L'antisérum est dilué en série dans un 96 puits à fond en U plateau de microtitration, à laquelle est ajoutée une suspension de Revercells. Les échantillons sont mélangés et ensuite incubées à 37 ° C pendant 60 minutes. Passé ce délai, les échantillons peuvent ensuite être facilement marqué pour VE, + ve et les réactions intermédiaires hémagglutination (-/+). Cette approche permet la réactivité et le titre d'un échantillon de sérum à être évalués en utilisant une technique rapide et simple. La vidéo couvre la théorie derrière le dosage, comment les résultats sont lus et interprétés, comment déterminer le titre, la façon dont le dosage peut être modifié et les problèmes associés à l'utilisation de cette technique.

Protocole

Préparation de la solution saline tamponnée 5x véronal (VBS)

1. Pour préparer la Saline véronal Buffered (VBS), trois solutions distinctes doivent être préparées.
2. Préparer la solution en dissolvant une 21.25gm de NaCl et d'0.94gm barbitone de sodium dans 350ml d'eau distillée. Les concentrations finales des barbitone NaCl et de sodium sont 1,02 et 13mm respectivement.
3. Préparer la solution 2 en dissolvant 1.44gm des barbitone dans 125ml d'eau distillée chaude. La concentration finale de barbitone est 62.5mm.
4. Préparer une solution 3 en dissolvant 20.33gm de MgCl ₂ et 4.41gm _de CaCl2 dans 100 ml d'eau distillée....

Discussion

Le test d'hémagglutination est une technique très simple qui permet à un grand nombre d'échantillons de sérum pour être évalué dans un court laps de temps. Il a également l'avantage d'être lu sans avoir besoin d'équipement spécialisé, à l'œil étant adapté. Cette technique peut également être modifiée pour la détection de l'hormone gonadotrophine chorionique humaine présente dans l'urine, dans le cadre d'un test d'inhibition d'hémagglutination. Par rapport à un test d'hémag.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Revercells	CSL	02490201	Utiliser à 1 % en concentration finale
Sérum anti-A	CSL	02611305
Plaque de 96 puits, fond rond (U)	TRP	92097	Doit être à fond rond (U)
Solution saline tamponnée au véronal			Utiliser à 1x en concentration finale
Pièce/incubateur à 37°C
Gants jetables