Test d’alimentation : évaluation des préférences alimentaires chez Drosophila melanogaster

Résumé

Source : Bovier, T. F., et al. Méthodes pour tester la perturbation endocrinienne chez Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Cette vidéo décrit un test d’alimentation pour les mouches des fruits dans lequel des aliments colorés sont utilisés pour surveiller l’alimentation et l’effet que les composés ajoutés peuvent avoir sur l’activité alimentaire. L’exemple de protocole teste les effets de plusieurs perturbateurs endocriniens (PE).

Protocole

Ce protocole est un extrait de Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Dosage de l’alimentation

REMARQUE : Ce test est recommandé pour tester si la présence de l’EDC sélectionné dans le milieu pourrait affecter l’alimentation des mouches.

1. Mettez 15 jeunes mouches dans des flacons contenant du milieu de semoule de maïs (CM) complété par différentes concentrations de l’EDC sélectionné et un aliment colorant. Laissez les mouches se nourrir sur le support pendant 1 jour.
   REMARQUE : Par exemple, utilisez un colorant rouge n° 40 (1 mg/mL).
2. Mettez 15 jeunes mouches dans des flacons contenant du CM complété par le solvant seul et un aliment colorant pour le contrôle. Laissez les mouches se nourrir sur le support pendant 1 jour.
3. Anesthésier individuellement chaque groupe de mouches avec de l’éther.
   1. Transférez les mouches de chaque groupe dans un récipient cylindrique en verre (éthériseur) avec un entonnoir inséré dans l’extrémité ouverte, en inversant le flacon sur l’entonnoir et en tapotant doucement les deux récipients ensemble pour faire tomber les mouches dans l’éthériseur.
      REMARQUE : L’entonnoir les empêchera de sortir de l’éthériseur.
   2. Abattez les mouches en tapotant doucement l’éthériseur sur une surface douce, comme un tapis de souris, et remplacez rapidement l’entonnoir par un bouchon de coton et de gaze imbibé d’éther.
   3. Attendez environ 1 min jusqu’à ce que les mouches tombent au fond et cessent de bouger.
      REMARQUE : Ne dépassez pas le temps ou les mouches mourront.
4. Placez les mouches immobilisées sous un stéréomicroscope et comparez la coloration abdominale de chaque groupe de traitement par rapport au groupe témoin.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
17α-éthinylestradiol	sigma	E4876-1G
Gélose pour Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphénol A	sigma	Référence 239658-50G
Bisphénol AF	sigma	Référence 90477-100MG
Maïs	CA' BIANCA
Diethylique	sigma
Flacons de drosophile	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Flacons de drosophile	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Flacons de drosophile	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
éthanol	FLUKA	Référence 2860
Etheriseur	Artisanat		récipient cylindrique en verre avec un bouchon en coton
Mixeur plongeant Pimmy	Ariete		robot ménager
Levure Instant Success	ESKA		Levure en poudre
Colorant rouge n° 40	sigma	Référence 16035
Stéréomicroscope avec lumières LED	Leica		S4E