Traquer les mouches qui marchent librement : une méthode pour évaluer la locomotion chez la drosophile

Résumé

Source : Sun, M. et Chen, L. L. Une nouvelle méthode pour modéliser l’encéphalopathie traumatique chronique chez la drosophile. J. Vis. Exp. (2017).

Cette vidéo décrit comment suivre librement les mouches qui marchent pour évaluer leur capacité générale de locomotion. Le protocole présenté démontre la configuration du test et l'analyse des données à l'aide d'un logiciel de suivi vidéo.

Protocole

Ce protocole est un extrait de Sun et Chen, A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila, J. Vis. Exp. (2017).

1. Suivi des mouvements assisté par vidéo

1. Remplissez une boîte de Pétri de 6 cm de diamètre avec de l’élastomère de silicone transparent pour créer l’arène de suivi. Laissez un espace de 3 mm entre le silicone et le couvercle du plat pour permettre aux mouches de se promener librement mais pas de voler.
2. Anesthésie quatre mouches du groupe simulé ou du groupe traité à chaque fois et place-les dans l’arène. Laissez les mouches à 22 °C pendant 1 h.
3. Placez une caméra CCD (Charge-Coupled Device) au-dessus des arènes et enregistrez pendant 5 min.
4. Analysez les trajectoires de mouvement enregistrées à l’aide du logiciel Ctrax (disponible gratuitement auprès de Caltech). Exportez les données suivies dans un format compatible avec un langage de programmation (par exemple, Matlab) et analysez les données en fonction de la distance parcourue par image. Calculez la distance moyenne de marche de chaque mouche et combinez-la avec toutes les autres mouches enregistrées/groupe pour obtenir une distance cumulative moyenne parcourue par la population de fichiers du même groupe.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Boîtes de Pétri de 60 mm	Fisher Scientific	FB0875713A	Utilisé comme pistage des arènes
Régulateur de débit	Genesee Scientific	59-122WC
Pinceau fin	Genesee Scientific	59 à 204
Coussin anti-mouches	Genesee Scientific	59 à 114
Élastomère de silicone Sylgard	Dow Corning	4019862
Caméra CCD	Microsoft	HD-5000
Traqueur de mouches marchantes Ctrax	Caltech	Ctrax 0.2.11
Boîte à outils de traitement d’images MATLAB	MATLAB	R2015b