Essai de gradient de température : une méthode pour tester la préférence de température chez les larves de drosophile

Abstract

Source : Liu, J., et al. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).

Les mouches des fruits de la drosophile peuvent distinguer de petits changements de température et donc sélectionner des environnements avec des conditions thermiques favorables. Cette vidéo décrit un test comportemental qui teste la préférence de température des larves de drosophile sur un gradient thermique linéaire.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Liu et al. Un essai de gradient de température pour déterminer les préférences thermiques des larves de drosophile, J. Vis. Exp. (2018).

1. Configuration du gradient de température

1. Préparation d’une pente unidirectionnelle
   1. Pour créer un environnement ambiant humide pendant les essais, placez les deux blocs d’aluminium reliés à deux bains-marie sur du papier absorbant humide, séparés de 10 cm (Figure 1A).
   2. Allumez les deux bains-marie ~2 h avant de commencer le test pour laisser suffisamment de temps pour....

Results

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Gradient de température sur plaque d’agarose (pente)	Températures des bains d’eau	Températures des blocs d’aluminium
10,0 à 25,0 °C (1,5 °C/cm)	~6,5-7 °C/~28,5 °C	~8,5 °C/~26,8 °C

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Appareil de dosage de gradient
PolyScience 9106, Bain de circulation réfrigéré/chauffé 6L	Thomas Scientific	Référence 9106	Ce modèle n’est plus fabriqué. Les modèles de remplacement mis à jour incluent : 1186R00 et 1197U04 pour 120 V, 60 Hz, ou 1184L08 et 1197U04 pour 240 V, 50 Hz.
Plaque de dosage en aluminium (pour gradient unidirectionnel)			Dimensions extérieures : 14 x 10,1 x 0,9 cm, dimensions intérieures : 12,9 x 8,7 x 0,8 cm, anodisé noir.
Plaque en aluminium (pour pente bidirectionnelle)			25 x 22 x 0,2 cm, anodisé noir.
Bloc d’aluminium			Dimensions extérieures : 25,5 x 5 x 1,4 cm, les paramètres des canaux intérieurs sont illustrés à la figure 1D.
Connecteur pour blocs et tubes en aluminium	McMaster-Carr	Référence 91355K82
Tube sanitaire en silicone Tygon	Tygon	Référence 57296	Mur de 1/4 po (ID) x 3/8 po (OD) x 1/16 po (D)
nom	compagnie	Numéro de catalogue	Commentaires
Articles et réactifs pour le dosage
pilon	Scientifique américain	Référence 17361	Pilon pour tubes de microcentrifugation de 1,5 mL
thermomètre	coup de chance	51II
Thermocouple	coup de chance	Type K
Couvercle universel pour microplaques	Corning	Référence 6980A77
Plat de 35 mm	Corning	Référence 9380D40
Ruban d’étiquetage (pour dégradé bidirectionnel)	Fisher Scientific	Référence 15-951	Fisherbrand ruban d’étiquetage 2 po x 14 verges
Agarose	Invitrogen	16500500	Préparez une solution à 1 %
saccharose	sigma	S0389-5KG	Préparez la solution à 18 % juste avant de commencer le test
Pinceau	Fisher Scientific	Référence 11860
Tubes à centrifuger de 50 mL	Denville	C1062-P
Scoopula	Fisher Scientific	14-357Q
Flacon rond à col large de 500 mL	Pyrex	Référence 1395-500
Crépine à cellules (pore de 300 mm)	PluriSelect	43-50300	Article facultatif pour le lavage des larves
Boîte en carton (plateau de flacons)	Genesee Scientific	FS32-124