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Lee et Kang, Mesurer l’effet des produits chimiques sur la croissance et la reproduction de Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2017).
1. Essai de ponte de C. elegans
- Incuber les œufs synchronisés selon l’âge sur la plaque NGM contenant du DMSO ou de l’étoposide pendant 64 h (avant la première naissance) jusqu’au stade jeune adulte à 20 °C
REMARQUE : Il est facultatif d’utiliser les vers des expériences de mesure de croissance. Il est pratique de faire la mesure de la croissance et l’essai de ponte ensemble.
- Transférez 5 vers adultes dans les nouvelles plaques NGM sans produits chimiques (condition 1, traitement chimique dans un certain laps de temps, de l’œuf au stade jeune adulte) ou dans la nouvelle plaque NGM contenant le même prétraitement chimique (condition 2, exposition continue aux produits chimiques pendant toute la durée de l’expérience), puis incubez-les pendant 24 h.
REMARQUE : Il est recommandé de faire des réplicats en utilisant 3 à 5 plaques NGM pour chaque traitement ; Ces réplicats peuvent être utilisés pour l’analyse statistique.
- Transférez dans la nouvelle plaque NGM comme décrit ci-dessus et comptez le nombre d’œufs chaque jour. Comptez les vers qui ont rampé, sont morts et ont éclos à l’intérieur.
- Répétez ces étapes jusqu’à ce que les vers ne pondent plus d’œufs, généralement dans 5 jours.
- Calculez le nombre d’œufs pondus par ver dans chaque assiette et additionnez ces valeurs tous les jours pendant 5 jours pour déterminer le nombre total d’œufs pondus.
REMARQUE : Excluez du calcul le nombre de vers qui se sont échappés et qui ont éclos en interne.