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Test d’habituation au toucher : une méthode pour étudier l’apprentissage non associatif chez C. elegans

30 avril 2023

Dans cet article

Résumé

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Source : Mersha, M. D., et al. Conséquences comportementales et reproductives à long terme de l’exposition embryonnaire à des substances toxiques à faible dose. J. Vis. Exp. (2018).

Cette vidéo présente le test d’habituation au toucher, une méthode comportementale de C. elegans permettant d’évaluer la mécanosensation et de quantifier le temps d’accoutumance.

Protocole

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Le protocole suivant est un extrait de Mersha et al. Conséquences comportementales et reproductives à long terme de l’exposition embryonnaire à de faibles doses de substances toxiques, J. Vis. Exp. (2018)

  1. Essai d’habituation au toucher antérieur
    1. Transférez environ 10 jeunes vers adultes synchronisés dans de nouvelles plaques NGM non ensemencées à l’aide d’un pic en fil de platine de 30 G stérilisé au feu. Laissez les vers tranquilles pendant 5 minutes pour leur laisser le temps de s’acclimater à la nouvelle plaque.
    2. Pour la réponse d’accoutumance, utilisez un poil de sourcil attaché à l’extrémité d’une brochette en bois ou d’un cure-dent, et stérilisez en trempant dans de l’éthanol à 70 %. Essuyez avec un mouchoir propre non pelucheux et attendez 1 minute pour que l’éthanol s’évapore. Touchez doucement le ver sur la tête (avant le bulbe pharyngé) à l’aide des poils des sourcils. Répétez les touchers, en laissant 10 secondes entre les contacts afin de permettre au ver de se rétablir.
    3. Continuez à toucher (en laissant des intervalles de 10 s entre les stimulus) jusqu’à ce que le ver ne recule plus. À ce stade, le ver s’est habitué au stimulus. Notez le nombre + ber de contacts nécessaires pour que le ver s’habitue.
    4. Analysez la différence entre les taux d'habituation moyens des témoins traités et non traités à l'aide de l'ANOVA à un facteur suivie du test post hoc de Tukey.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
EtOHSigma-Aldrich64-17-5
N2 (C. elegans de type sauvage) versLaDépôt à l’Université du Minnesota
Médiator en fil de platineGenesee Scientific59-AWP
plaques de PetripêcheurRéférence : 07-202-011
Microscope de dissectionAmScopeSM-2TYY

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Mots-clés

M canosensationToucher Ant rieurR ponse de RenversementIntervalle Inter stimulusPlaques NGMVers Synchronis sToucher L ger

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