Imagerie calcique : une méthode pour visualiser l’activité neuronale chez C. elegans vivants

Résumé

Source : Turek, M. et al. Microchambres d’agarose pour l’imagerie calcique à long terme de Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

Cette vidéo présente les concepts derrière l’imagerie calcique et comprend un exemple de protocole pour l’imagerie en accéléré des vers contenus dans des puits d’agarose moulés.

Protocole

Ce protocole est un extrait de Turek et al, Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).

1. Imagerie calcique

1. Utiliser des souches transgéniques exprimant des capteurs calciques génétiquement codés tels que HBR16 (goeIs5[pnmr-1 ::SL1-GCaMP3.35-SL2 ::unc-54-3'UTR, unc-119(+)]).
2. Utilisez un microscope composé équipé pour l’épifluorescence à grand champ. Connectez la sortie TTL de la caméra EMCCD à l’ent....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
système LED	CoolLED	pE-2
Microscope composé	Nikon	attacher
Caméra EMCCD	Andor	L’iXon 897	maintenant vendu sous le nom de iXon Ultra 897
Platine Z pour le microscope	préalable	Nano Scan Z
Platine X-Y pour le microscope	préalable	Proscan III
Filtre de lumière rouge	Chroma	ET660/50m
Boîte de Pétri de 35 mm	Faucon	Boîtes de Pétri jetables Falcon, stériles, Corning