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Article de méthode

Préservation des tissus enrobés de paraffine fixée au formol (FFPE) : une méthode pour étudier la morphologie des tissus

5.5K vues

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30 avril 2023

Dans cet article

Résumé

Source : Nagaraj A.S., et al., Établissement et analyse d’explants de tranches tumorales comme condition préalable aux tests diagnostiques. J. Vis. Exp. (2018)

La vidéo suivante décrit comment préserver la morphologie d’un tissu avec fixation au formol et enrobage de paraffine.

Protocole

1. Fixation et traitement des tranches de tissu

  1. Soulevez avec précaution la référence 0 h non cultivée ou la tranche cultivée sur un papier filtre imbibé de PBS.
    1. Pour ce faire, ajoutez 2 à 3 ml de PBS sur un papier filtre placé dans une plaque de 10 cm. Placez la tranche sur le papier filtre et soulevez le papier filtre à l’aide d’une pince.
    2. Transférez le papier filtre dans une histocassette et ajoutez une goutte d’hématoxyline diluée (1:1 dans de l’eau désionisée) sur la tranche de tissu pour marquer visiblement la position de la tranche pendant les étapes de traitement suivantes (figure 1D).
    3. Fermez la ca....

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Résultats

figure-results-1
Figure 1 : Représentation schématique du flux de travail pour l’établissement et l’analyse d’explants de tranches de CPNPC murins dérivées de tumeurs.(A) Schéma décrivant la collecte et la préparation des poumons porteurs de tumeurs pour le tranchage. Les lobes pulmonaires sont prélevés sur une souris et le tissu tumoral est disséqué loin des tissus normaux. La pointe de flèch.......

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Déclarations de divulgation

Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Plaque de culture tissulaire de 10 cm Sarstedt Référence 83.1802
Pbs Lonza BE17-517Q
Formaldéhyde pêcheur F/1501/PB08
Papier cassette histo à trois volets Diagnostic du cancer DX26280
Cassettes Histo VWR Référence 720-2199
microtome Thermo Fischer Scientific HM355S
Microtome à lame vibrante Leica VT1200 SLeica Biosystems14048142066
Hématoxyline pour la coloration H&EMerckRéférence 1.09249.0500
Hématoxyline pour la contre-colorationDakoS3309
éosinesigmaRéf. E4382
Solution saline équilibrée de Hank (HBSS)sigmaN° H6648

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