Modèle de cancérogenèse cutanée en deux étapes induite par des produits chimiques : un modèle murin expérimental de cancer de la peau

Résumé

Source : Vähätupa, M. et al. Modèle de cancérogenèse cutanée induite par des produits chimiques utilisant du diméthylbenz[a]anthracène et du 12-O-tétradécanoyl phorbol-13-acétate (DMBA-TPA). J. Vis. Exp. (2019)

Cette vidéo décrit la procédure d’induction de la carcinogenèse cutanée en deux étapes pour étudier l’initiation tumorale par l’application topique de produits chimiques. Dans un premier temps, un mutagène, le DMBA, est appliqué sur la peau d’un modèle murin qui initie la formation de tumeurs en provoquant des mutations dans les cellules souches, suivi de l’application d’un stimulateur de croissance, le TPA, qui accélère la formation du papillome cutané.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Animaux de laboratoire, réactifs et équipements

1. Utilisez des souris du même âge et du même sexe. Commencez l’étude à l’âge de 7 à 9 semaines, car la peau de la plupart des souris est en télogène (la phase de repos) vers cet âge.
2. Observez le comportement des animaux pendant l’étude et s’ils se battent, ce qui arrive souvent avec les mâles, hébergez-les séparément. Les combats peuvent provoquer des coupures dans la peau, ce qui favo....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
7,12-diméthylbenz[a]anthracène (DMBA)	sigma	D3254-100MG	Nocif en cas d’ingestion et peut causer le cancer. Conserver à l’abri de la lumière.
acétone	sigma	1000141011	S’évapore rapidement et est inflammable.
Attane vétérinaire 1000 mg/g	Piramal Soins Intensifs Limitée		Isoflurane liquide pour inhalation
Clipper Isis fonctionnant sur batterie	Albert Kerlb GmbH	GT421	Pour raser la fourrure
CONTRAfluran-Restgasfilter	ZeoSys GmbH		Pour l’anesthésie
Linex Nature N1030 Règle 30 cm	Avantage d’affaires Staples	Référence 60383	Pour mesurer les papillomes
Pipette Tacta 100-1000 ul	Sartorius	LH-729070
Pipette Tacta 20-200 ul	Sartorius	LH-729060
Phorbol 12-myristate 13-acétate alias 12-Otetradecanoylphorbol-13-acétate (TPA)	Enzo	BML-PE160-0001
Mekasoft	Mekalasi	Référence 23008	Nappe de table
Balance de précision PLJ-C/PLJ-G	KERN & SOHN GmbH	PLJ 600-3CM
Souris (Balb/c JRj)	Janvier labs		D’autres souches également possibles
Souris (C57BL/6JRj)	Janvier labs		D’autres souches également possibles
Appareil photo numérique Panasonic Lumix DMC-FS5	Panasonic