Transfert de gènes médié par un virus dans le noyau cochléaire dorsal de souris pour une stimulation auditive induite par la lumière

Dans cet article

Résumé

Source : Kozin, E. D., et.al. Visualisation directe du noyau cochléaire dorsal murin pour la stimulation optogénétique de la voie auditive. J. Vis. Exp. (2015)

Cette vidéo démontre le transfert de gènes médié par le virus dans le noyau cochléaire dorsal (DCN) de souris pour permettre la stimulation auditive induite par la lumière. Un vecteur viral codant pour l’opsine, un canal ionique sensible à la lumière, est injecté dans le DCN à la suite d’une craniotomie et d’une aspiration cérébelleuse pour un accès direct. Les opsines exprimées permettent aux neurones d’être activés par la lumière, fournissant un modèle pour étudier les réponses des voies auditives à l’aide de l’optogénétique.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Aspiration cérébelleuse

À l’aide d’une aspiration à 5 français, aspirez la partie la plus latérale du cervelet gauche recouvrant le DCN jusqu’à ce que le DCN soit visuel (Figure 1, panneau de droite). Retirez environ 1/4 à 1/3 du cervelet gauche. Le principal point de repère adjacent à la DCN est l’ampoule du canal semi-circulaire supérieur.
REMARQUE : L’aspiration du cervelet est l’étape clé d....

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Résultats

Figure 1 : L’aspiration cérébelleuse partielle démontre l’accès au noyau cochléaire dorsal. Panneau gauche : Une fois la souris placée dans le support, une incision est pratiquée verticalement à travers la peau et les tissus mous le lo.......