Administration intraveineuse de nanoparticules thérapeutiques dans un modèle de glioblastome murin

Résumé

Source : Kim, B. D., et al. Livraison de nanoparticules d’une charge utile d’oligonucléotide dans un modèle animal de glioblastome multiforme. J. Vis. Exp. (2024)

Cette vidéo démontre l’injection intraveineuse de nanoparticules thérapeutiques chez une souris porteuse d’un glioblastome. La méthode permet une administration ciblée à travers la barrière hémato-encéphalique et prend en charge l’imagerie non invasive pour évaluer la biodistribution des nanoparticules et l’efficacité thérapeutique dans les tumeurs cérébrales.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Administration de MN-anti-miR10b

REMARQUE : Dans cette étude, les injections ont été effectuées une fois par semaine pendant 6 semaines à partir de 7 jours après l’implantation, mais le même protocole peut être utilisé pour différentes fréquences d’injection.

1. Pesez la souris et calculez le volume de MN (nanoparticule magnétique)-anti-miR10b à administrer à la souris. Les doses de MN-anti-miR10b sont administrées à raison de 20 mg Fe (fer)/kg dans des modèles murins de GBM (glioblastome multiforme). Par exemple, une souris de 20 g reçoit une dose de 80 μL de 5 mg Fe/mL de MN-anti-miR10b. Les souris témoins reçoivent un volume égal de PBS (solution saline tamponnée au phosphate) conforme à ce schéma posologique.
2. Préparez une seringue de 28 G avec la dose de MN-anti-miR10b et assurez-vous qu’il n’y a pas de bulles dans la solution d’injection.
3. Anesthésie la souris sous 2 à 4 % d’isoflurane pour l’induction et 1,5 à 2 % pour l’entretien avec un débit de 1,5 L/min dans une boîte d’induction. Déplacez la souris vers un cône nasal et continuez à administrer l’anesthésie. Vérifiez la profondeur de l’anesthésie et appliquez une pommade vétérinaire.
4. Stérilisez la queue avec une lingette isopropanol à 70 % et laissez sécher l’excès d’alcool.
5. Faites pivoter la queue pour positionner les veines caudales latérales en haut de la queue. Ensuite, en visant la veine, insérez l’aiguille dans la queue et établissez un vide en tirant le piston vers l’arrière.
6. Insérez l’aiguille jusqu’à ce que le sang pénètre dans la seringue, indiquant une entrée réussie dans la veine.
7. Injectez lentement MN-anti-miR10b et rétractez l’aiguille après l’administration complète. Appliquez une pression sur le site d’injection avec de la gaze jusqu’à ce que le saignement cesse.
8. Retirez la souris du cône nasal. Surveillez la souris jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie et ambulatoire.
   REMARQUE : L’administration de nanoparticules en bolus peut provoquer une détresse respiratoire. Surveillez attentivement la souris et appliquez immédiatement de légères compressions thoraciques s’il y a des signes de détresse respiratoire.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
nues athymiques « J :NU »	Jackson Laboratory	RRID :IMSR_JAX :007850	Modèle de souris immunodéprimées
70 % isopropoyl	alcohol wipe Cardinal	MW-APL	Lingette antiseptique topique pour l’implantation de la tumeur et l’injection de la veine caudale
Isoflurane	Covetrus	11695067772	Anethesia
Vaporisateur d’isoflurane	SOMNI Scientific	VS6002	Appareil d’anesthésie
Seringue à insuline 1CC 29G X 1/2"	Becton, Dickinson	324704	Seringue pour l’injection de D-Luciferin et l’injection de nanoparticules dans la veine de la queue

souris