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Article de méthode

Induction de la différenciation de Vibrio parahaemolyticus en cellules d’essaim

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26 septembre 2025

Dans cet article

Résumé

Source : Heering, J., et al. Induction de la différenciation cellulaire et imagerie unicellulaire des cellules nageuses et de l’essaim de Vibrio parahaemolyticus . J. Vis. Exp. (2017)

Cette vidéo montre l’induction de la différenciation des cellules d’essaim chez Vibrio parahaemolyticus à l’aide d’un milieu gélosé spécialement préparé. En manipulant les signaux environnementaux tels que l’épuisement en fer, la supplémentation en calcium et le contact de surface, les bactéries sont stimulées pour passer de leur forme nageuse à des cellules d’essaim allongées avec des flagelles latéraux. Ces cellules différenciées se propagent sur la surface solide, formant des éclairs d’essaim caractéristiques qui signifient un changement morphologique réussi.

Protocole

1. Induction de la différenciation des cellules de l’essaim

NOTE: Les étapes suivantes décrivent comment induire la différenciation de V. parahaemolyticus dans son cycle de vie cellulaire d’essaim et comment stimuler la prolifération sur des surfaces solides.

1. Suspendre 4 g de gélose à perfusion cardiaque (HI) dans 100 mL de jjdH2O afin de préparer les plaques d’essaimage.

2. Faites bouillir soigneusement la solution de gélose HI au micro-ondes et secouez le flacon de temps en temps jusqu’à ce que la poudre soit dissoute. Autoclave à 121 °C ....

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Résultats

figure-results-1

Figure 1 : Induction de la différenciation de l’essaim et préparation des cellules pour l’imagerie microscopique. Visualisation simplifiée du flux de travail pour produire des cellules d’essaim de V. parahaemolyticus .......

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Composants multimédias
LB moyenRothX968.3 
Gélose Difco, granuléeBD214510Pour la préparation de la gélose LB avec un milieu LB
Gélose à l’infusion cardiaque DifcoBD244400Pour la préparation des plaques d’essaimage de gélose HI
Agarose NEEO, ultra qualitéRoth2267.3Pour la préparation des tampons d’agarose de microscopie
Additifs
2,2'-bipyridyleSigma AldrichD216305-25GPour la préparation des plaques d’essaimage de gélose HI
Chlorure de calcium dihydratéRoth5239.1Pour la préparation des plaques d’essaimage de gélose HI
Matériel
Boîte de Pétri 150 mm x 20 mm avec camesSarstedt82.1184.500Pour la préparation des plaques d’essaimage de gélose HI
kelvitron t (B 6420)Hérée-Utilisé pour le séchage des plaques d’essaimage de gélose HI

Étiquettes

Différenciation des cellules swarmersdéplétion en fersupplémentation en calciumcontact de surfacepréparation du milieu géloseessaimage bactérienflagelles latérauxflares d'essaimageinduction de l'expression génique