Cette vidéo fait la démonstration d’un essai de gélose semi-solide à base de colorant redox pour évaluer la motilité bactérienne en distinguant visuellement les souches mobiles et non mobiles.
NOTE: Quatre-vingts souches ont été isolées dans le milieu aquatique et identifiées à l’aide d’un instrument automatisé d’identification des bactéries (voir le tableau des matières), notamment Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Vibrio spp., Klebsiella pneumoniae et Aeromonas hydrophila (tableau 1). Staphylococcus aureus (voir la table des matières) a été utilisé comme témoin négatif non mobile ; Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa et Salmonella typhimurium (voir le tableau des matières) ont été utilisés comme souches témoins positives.
Identifier les souches bactériennes d’essai à utiliser pour l’analyse de la motilité.
Inclure les témoins négatifs non mobiles et les souches de contrôle positives mobiles.
Observation de la motilité bactérienne améliorée par TTC
Prélever des colonies uniques de bactéries d’essai sur des plaques de gélose et les inoculer dans le milieu semi-solide avec du TTC (chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium) en les perforant avec des aiguilles d’inoculation.
Cultivez les tubes à 37 °C dans l’incubateur pendant 24 à 48 h pour observer les résultats.
Observer l’état de croissance : caractériser la bactérie comme non mobile (-) si seule la ligne de ponction est rouge. Caractérisez la bactérie comme mobile (+) si la couleur rouge s’étend légèrement vers l’extérieur le long de la ligne de perforation.
Tableau 1 : Comparaison de la motilité bactérienne.
Filtrer
Milieu semi-solide avec 0,4 % de gélose
Milieu semi-solide avec 0,4 % de gélose et 0,005 % de TTC
24 h
48 h
24 h
48 h
P. aeruginosa ATCC27853
+
+
+
+
E. coli ATCC25922
+
+
+
+
S. typhimurium ATCC14028
+
+
+
+
S. aureus ATCC25923
-
-
-
-
E. coli (15)
12
14
13
14
Salmonella spp. (8)
7
8
8
8
A. hydrophila (20)
18
20
20
20
Vibrio spp. (8)
7
8
8
8
P. aeruginosa (24)
18
20
22
23
K. pneumoniae (5)
-5
-5
-5
-5
Les nombres indiquent le nombre de déformations positives (+) et de taches négatives (-).
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Matériaux
Liste des matériaux utilisés dans cet article
Nom
Entreprise
Numéro de catalogue
Commentaires
Bacto Agar
Difco
Escherichia coli
ATCC
ATCC25922
Contrôle positif
Pseudomonas aeruginosa
ATCC
ATCC27853
Contrôle positif
Staphylococcus aureus
ATCC
ATCC25923
Contrôle non mobile négatif
Tryptose
OXOÏDE
TTC (chlorure de 2,3,5-triphényl-tétrazolium)
Sigma
298-96-4
Système automatisé d’identification microbienne VITEK 2
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