Réalisation d’une administration bactérienne intratrachéale dans un modèle de souris

Résumé

Source : Venuprasad, K., et al. Administration intra-trachéale d’Haemophilus influenzae dans des modèles murins pour étudier l’inflammation des voies respiratoires. J. Vis. Exp. (2016)

Cette vidéo démontre l’administration intratrachéale d’un inoculum bactérien pathogène pulmonaire dans une souris anesthésiée pour modéliser une infection des voies respiratoires inférieures.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Instillation intra-trachéale (i.t.)

1. Injecter à la souris par voie intrapéritonéale (i.p.) 0,1 mL/10 g de poids corporel de souris avec une solution de kétamine à 150 mg/ml + 20 mg/ml de xylazine. La procédure doit être effectuée dans la cagoule avec une source de lumière pour garder l’animal au chaud.
2. Pincez l’espace interdigital de la souris pour vérifier que la souris est correctement anesthésiée.
3. Placez la souris sur son dos. Rasez la zone ventrale du cou et désinfectez avec de la chlorhexidine et de l’alcool éthylique à 70 %.
4. Soulevez la peau de la partie ventrale supérieure du cou à l’aide d’une pince à dents de rat. Faites une petite incision (0,5 à 1,0 cm) au-dessus du thymus à l’aide d’un scalpel et disséquez soigneusement le muscle pour exposer la trachée.
   1. À l’aide d’une seringue de 1 ml munie d’une aiguille de 27 g, injecter lentement 0,05 ml d’air, suivi de 0,05 ml d’Haemophilus influenzae non typable (NTHi) ou d’une solution saline comme témoin, puis de 0,05 ml d’air supplémentaire. Gardez l’animal à la verticale pendant environ 1 min.
5. Fermez l’incision avec de la colle chirurgicale. Gardez la souris couchée latéralement et au chaud pendant environ 10 min.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Solution rapide et habile	Sigma	GS500-500ML
Aiguille de seringue 20/26 G	BD	REF305115/175
Seringue de 1 mL	BD	RÉF 309602
Ciseaux de dissection, droits, 10 cm de long	Kentscientific	INS600393
Pince à iris, dentelée, 10 cm de long	Kentscientific	INS650915
Pince à épiler 5 en acier inoxydable, 11 cm de long	Kentscientific	INS600095