Injection intrapéritonéale de lipopolysaccharides bactériens chez la souris pour étudier les réponses immunitaires systémiques

Résumé

Source : Radulovic, K., et al. Injections de lipopolysaccharides dans des souris pour imiter l’entrée de produits d’origine microbienne après une rupture de la barrière intestinale. J. Vis. Exp. (2018)

Cette vidéo présente une procédure étape par étape pour injecter des lipopolysaccharides (LPS) intrapéritonéalement chez des souris afin d’induire une inflammation systémique.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité local de soins aux animaux institutionnels et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Injection intrapéritonéale de lipopolysaccharides (LPS) sur les souris
   1. Aspirez la solution de travail LPS dans une seringue de 0,5 mL avec une aiguille de 30 G dans un flux d’air laminaire.
   2. Peser les femelles C57Bl/6 souris (âgées de six à dix semaines) et calculer la quantité de LPS qui sera injectée : 10 μL (2 μg)/g de poids corporel.
      REMARQUE : Par exemple, si une souris pèse 20 g, il faut injecter une solution de travail de 20 g x 10 μL = 200 μL de LPS.
   3. Manipulez la souris doucement mais fermement et maintenez l’animal d’une main. Assurez-vous que l’animal peut respirer normalement sans se tordre et se retourner pendant la contention.
   4. Inclinez légèrement le nez de la souris vers le sol pour exposer l’abdomen à l’injection. Localiser la ligne médiane de l’abdomen et le point d’injection dans le bas de l’abdomen, à gauche ou à droite de la ligne médiane. Injecter du sérum physiologique tamponé par voie péritonéale (i.p.) au lieu de LPS sur des souris témoins.
   5. À main levée, injectez le volume approprié (le volume calculé à l’étape 1.2) de la solution de travail LPS. Assurez-vous que l’aiguille est entrée dans la cavité péritonéale, sinon des mauvaises injections dans la couche musculaire abdominale peuvent se produire. Cependant, ne plongez pas trop profondément avec l’aiguille dans la cavité péritonéale pour éviter de blesser les organes internes situés dans cette zone.
   6. Ramenez l’animal avec précaution dans la cage avec jusqu’à 5 souris par cage.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
LPS Escherichia coli O111 :B4	Invivogen, San Diego, CA, États-Unis.	tlrl-eblps
Omnican 50 seringue à insuline à usage unique	B. Braun Melsungen, Melsungen, Allemagne	9151125