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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité local de soins aux animaux institutionnels et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Prélèvement du lumen vaginal pour quantifier la charge de GBS
- Préparez un tube micro-centrifuge de 1,5 ml par souris en ajoutant 100 μl de solution physiologique tamponnée phosphate (PBS). Juste avant de prélever le pré-prélèvement dans PBS.
- Immobilisez la souris et insérez le prélèvement à 10 mm dans la lumière vaginale. Faites pivoter doucement le prélèvement 4 fois dans le sens horaire et 4 fois dans le sens antihoraire, en appliquant une légère pression sur la paroi vaginale.
- Transférez le prélèvement dans le tube microcentrifuge de 1,5 ml avec 100 μl de PBS. Avant le plaque, faites passer le tube de la microcentrifuge pendant ~15 secondes pour libérer les bactéries du couville. Diluez en série chaque échantillon dans des PBS et placez 20 μl de dilutions 1:10 à 1:10 000 sur des plaques d’agar à milieu différentiel préparées selon les instructions du fabricant. Incubez les plaques à 37 °C pendant 24 heures. Les colonies de Streptococcus du groupe B (GBS) apparaîtront soit de couleur rose vif, soit mauve. D’autres plantes endogènes seront inhibées, ou apparaîtront sous forme de colonies bleues, blanches ou grises.