La peau douce et murin modèle d'infection des tissus est utilisé pour évaluer la fonction de virulence de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM) et les réponses immunologiques hôte. Ici, nous avons présenté un modèle d'infection sous-cutanée de la peau et les infections des tissus mous.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Infection sous-cutanée du Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline (SARM)
Dans cet article
Résumé
Résumé
Le SARM est une menace mondiale pour la santé publique, et la peau SARM et des tissus mous représentent désormais plus de la moitié de toutes les infections des tissus mous dans les États-Unis. Parmi les infections des tissus mous, la myosite, pyomyosite, et la fasciite nécrosante ont été de plus en plus signalés en association avec le SARM provenant de la communauté. Pour comprendre l'interaction entre le SARM et immunité de l'hôte conduisant à l'infection plus sévère, la disponibilité de modèles animaux est critique, permettant l'étude de l'hôte et facteurs bactériens. Plusieurs modèles d'infection ont été introduites afin d'évaluer la pathogenèse de S. aureus lors d'une infection cutanée superficielle. Ici, nous décrivons un modèle d'infection cutanée qui examine la peau, sous-cutanée, et de pathologies musculaires.
Protocole
1. Préparation de la SDRM de l'infection (deux jours avant l'infection)
- Inoculer une anse de SARM à partir d'une culture d'actions à une gélose au sang (gélose trypticase-soja (TSA)) la plaque.
- Vérifiez le phénotype hémolyse (une zone claire autour de chaque colonie) sur la plaque de gélose au sang.
- Choisissez une colonie qui a un phénotype hémolytique qui est compatible avec d'autres expériences.
- Inoculer la colonie dans 3 ml de bouillon Todd Hewitt (THB), avec l'antibiotique approprié, si nécessaire, dans un composant logiciel enfichable 15 ml tube à bouchon.
- Incuber à 37 ° C pendant une nuit sous agitation à 220 r....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
- La peau douce et murin modèle d'infection des tissus est un outil puissant pour l'évaluation in vivo de virulence d'un pathogène. La pathogénicité de S. aureus dans les infections cutanées et des tissus mous peuvent varier en fonction d'un certain nombre de paramètres. Il s'agit notamment de taille de l'inoculum, la phase de croissance bactérienne, la profondeur de l'inoculation, l'âge des souris, et le fond génétique de la souris 7, 8. Lorsque l'on examine la fonction de.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Aucun conflit d'intérêt déclaré.
Remerciements
Ce travail a été soutenu par une bourse de carrière Burroughs-Wellcome et par les Instituts nationaux de la santé accorde AI074832 au GY Liu.
....Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| THB | VWR international | 95025-314 | |
| DPBS | Invitrogen | 21-031-CV | |
| Seringue de 1 ml | BD Biosciences | 309602 | |
| Aiguille 27G1/2 | BD Biosciences | 305109 | |
| Agar au sang de mouton (TSA) | VWR international | 90004-328 |
Références
- Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I. S. Protection of Staphylococcus aureus-infected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunol Med Microbiol. 46, 187-197 (2006).
- Girish, V., Vijayalakshmi, A.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
Étiquettes
