Cet article décrit les procédures permettant d'effectuer un examen post-mortem de base d'une souris ou un rat, et la collecte des organes de base, ainsi que plusieurs types d'échantillons difficiles à partir de l'évaluation histologique, microbiologique et la PCR.
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Article de méthode
Autopsie de diagnostic et de certains tissus et de collecte des échantillons dans les rats et les souris
Dans cet article
Résumé
Résumé
Il ya différents types d'échantillons multiples qui peuvent être recueillies à partir d'un animal euthanasié en vue d'aider à diagnostiquer ou de découvrir des agents infectieux dans une colonie d'animaux. Le ramassage des tissus pour le traitement histologique supplémentaires peuvent influer sur la qualité des résultats des tests. Cet article décrit le comportement d'un examen de base brut, y compris l'identification de coeur, le foie, les poumons, les reins et la rate, ainsi que la manière de collecter ces organes. Par ailleurs quatre des techniques plus difficiles la collecte de tissus / échantillon sont démontrés. La collecte et la perfusion du poumon peut être particulièrement difficile car le tissu doit être bien gonflés avec un fixatif pour que l'intérieur du tissu à fixer correctement et approfondie pour permettre l'évaluation histologique. Cet article montre étape par étape pour supprimer la technique du poumon et le gonfler avec fixateur afin d'obtenir une fixation optimale du tissu dans les 24 heures. La collecte du cerveau peut être également difficile car le tissu est doux et facilement endommagée. Cet article montre étape par étape la technique d'exposer et de retirer le cerveau du crâne avec des dommages minimaux aux tissus. Les ganglions mésentériques est un type bon échantillon dans lequel de nombreuses communes de détecter les agents infectieux comme les virus entériques persister plus longtemps dans les ganglions lymphatiques que ce qu'ils sont excrétés dans les selles. Cet article démontre l'procédure étape par étape pour localiser et retirer aseptiquement le ganglion mésentérique. Enfin, l'identification des agents infectieux des voies respiratoires peut être effectuée par culture bactérienne ou des tests PCR de nasale et / ou bronchique fluides aspirats prélevés à l'autopsie. Cette procédure décrit l'obtention et la préparation de l'échantillon d'aspiration des voies respiratoires pour la culture bactérienne et tests de PCR.
Protocole
1. Préparation à l'autopsie
- Des éléments importants de tout examen post-mortem brut (autopsie) sont les antécédents de l'animal et la description des résultats.
- Un pathologiste vétérinaire lire vos diapositives histopathologiques peuvent ne pas avoir vu l'animal et compte sur vous pour les renseignements généraux.
- Décrivez exactement ce que vous voyez devant vous euthanasier l'animal. Par exemple, "souris femelle; l'un des cinq dans la cage; C57BL/6N, tête inclinée vers la droite" ou "rat brun de sexe masculin; souche inconnue; animaux se gratte, il ya perte de cheveux par endroits sur le dos, près de la queue et tête ».
- Utili....
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Discussion
La collecte des données à la fin de l'étude peut exiger un examen post-mortem des animaux. Décrivent bien ce qui est vu et n'oubliez pas d'examiner tous les tissus. Ces procédures sont principalement conçus pour optimiser l'autopsie et de collecte de l'échantillon pour la surveillance des maladies infectieuses, mais la plupart sont facilement adaptés aux enquêtes ont porté sur les incidents suspects de maladie ou d'épidémies dans laquelle peut-être seulement un sous-ensemble des procédures seraie.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs sont tous des employés de la Charles River laboratoire de diagnostic des rongeurs de laboratoire, où ces services sont offerts commercialement.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Nom du réactif | Société | Le numéro de catalogue | Commentaires |
| Planche à découper | Thermo Electron Corp Cat # 36114 | Cat # 36114 | |
| Petits ciseaux | Roboz | RS-5910, G204 | Lames de 23mm, 3,5 "de longueur, droites |
| Ciseaux Medium | Roboz | RS-6808, G207 | 5 " |
| Gros ciseaux | Roboz | RS-6826, G65 " | 6.25 " |
| Pince-courbée | Roboz | RS-8254 (M1/21004) | 4.5 ", dentelé, légère courbe |
| Pince-Microdissecting | Roboz | RS-5238 | Hudson (Ewald) |
| Pince-Tissue forceps | Roboz | RS - 8160 | Dent de rat |
| Flamme stérilisateur | Oxford Produits Labware | Bacti-Cinerator # 5889-001007 | |
| Scalpel | Diagnostic du cancer, Inc | Scalpels Finger # 60, Cat # FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pipette Pasteur 5 3 / 4 ", Cat # 14672-400 | |
| Sacs à autoclave | Manufacturing Company correcte | Sac Papier stérilisateur Cat # 021002 Pochettes (3100923) E09110 | Pour pipettes Pasteur |
| Ampoule pipette | VWR | Cat # 56310-240 | |
| Tubes Eppendorf | Sarstedt | 2mL microtube Safeseal, Réf # 72,695 | |
| Tubes Eppendorf | Argos | Cat microtube 5mL # T20765-C | |
| Seringue | De BD (Beckton Dickinson) | 1ml-309602-3 ml 300910 309603 5ml-Cat # 309604 10mL 20mL Cat # 309661 | |
| Aiguilles | BD | 26G-18G-309625 305195 | |
| Formol tamponné neutre | VWR | FBN 20L 10%, Cat # 16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Saline de la Banque de sang, Cat # 23-309-178 | |
| Bouillon de trypticase soja | Becton Dickinson | TSB: déshydratées, Cat # 211825 | |
| Tampon phosphate salin | Sigma-Aldrich | HA Tampon, Cat # P3813-10PAK | |
| Tasses formol | VWR | Cat 4 onces # 36318-852 8 onces Cat # 36318-860 16 onces Cat # 36318-858 | |
| Grande tasse de formol | Produits Oakridge | Cat contenant 32 onces # 0432-1100 | |
| Extra grande tasse de formol | VWR | Multipurpose PEHD contenant 160 onces Cat # 89038-282 | |
| Matériel de suture | Henry Schein | Suture tressée de soie chirurgicale, Réf # 100-5000, M766750 | Pour l'inflation des poumons de souris |
| Ficelle | Staples | Cat # QUA-46173 | Pour l'inflation poumon chez le rat |
Références
- AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
- Kittel, B. <....
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Réimpressions et autorisations
