Extraction individuelle du lobe de la prostate : une technique pour prélever des lobes prostatiques individuels sur la prostate de souris

Résumé

Source : Nath, D. et al. Identification, caractérisation histologique et dissection des lobes de la prostate de souris pour les modèles de culture de sphéroïdes 3D in vitro. J. Vis. Exp. (2018)

Cette vidéo décrit une technique pour prélever des lobes individuels de la prostate d’un modèle murin. Les lobes individuels peuvent ensuite être utilisés pour l’analyse histologique et la recherche sur le cancer.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Anatomie macroscopique de la prostate et microdissection du lobe individuel

REMARQUE : Ceci est illustré dans les figures 1(i-n) et la figure 2

1. Retournez le tissu avec une paire de pinces émoussées de manière à ce que la face dorsale soit tournée vers le haut, montrant les lobes dorsaux, qui ressemblent aux ailes d’un papillon.
2. Prélevez les lobes dorsaux en tenant le lobe à l’aide d’une pince et en coupant la base avec des ciseaux (figure 1j).
3. Retournez le tissu restant vers le côté ventral.
4. Récupérez les lobes latéraux, qui sont petits et enveloppent généralement l’urètre sur le côté, qui sont coincés entre les lobes antérieur, ventral et dorsal (Figure 1k).
5. Ensuite, récupérez les lobes ventraux, qui sont plus grands que les lobes latéraux et se trouvent sur l’urètre ventralement (Figure 1l).
6. Enfin, récoltez les lobes antérieurs, les plus grands des quatre, en coupant et en jetant l’urètre (Figure 1m).
7. Traitez les morceaux de tissu en fonction des besoins expérimentaux.

Résultats

Figure 1 : Dissection de la prostate de la souris. Images étape par étape pour la dissection de la prostate de souris à partir de l’UGS : (a) élimination de la graisse, (b) ablation de la vessie, (c) ablation du canal déférent, (d) vue ventrale de la prostate avec l’urètre, (e) vue dorsale de la prostate avec l’urètre, (

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Instruments chirurgicaux pour souris (Kit de dissection de souris)	Instruments de précision mondiaux	KIT DE SOURIS
Microscope de dissection
RPMI moyen	Thermofisher Scientific	11875093
Milieu de dissection (DMEM + 10 %FBS)	Thermofisher Scientific	Référence 11965-084
Sérum fœtal bovin	Thermofisher Scientific	10438018
PBS (solution saline tamponnée au phosphate)	Thermofisher Scientific	10010031
Collagènase	Thermofisher Scientific	17018029	Fabriquer 10x stock (10mg/ml) dans RPMI, filtrer, stériliser, aliquote et stocker à -20 °C
Seringues et aiguilles	Fisher Scientific