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Microextraction en phase solide : une technique basée sur des sondes pour l’extraction d’échantillons à partir de tissus greffés

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source : Stryjak, I. et al. Utilisation d’une biopsie chimique pour l’évaluation de la qualité des greffons. J. Vis. Exp. (2020)

Dans cette vidéo, nous démontrons l’extraction de métabolites à partir d’un rein de donneur pré-récolté, à l’aide d’une sonde SPME. Les métabolites extraits peuvent être utilisés pour effectuer des analyses métabolomiques et lipidomiques afin d’évaluer la qualité de l’organe pour la transplantation.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Toutes les procédures impliquant des participants humains ont été effectuées conformément aux directives institutionnelles, nationales et internationales en matière de bien-être humain et ont été examinées par le comité d’examen institutionnel local.

1. Préparation des sondes

  1. Préparez des sondes en alliage de titane-nickel (40 mm de longueur, 0,2 mm de diamètre) recouvertes d’un sorbant en mode mixte de 7 mm. Le nombre de sondes dépend des points temporels ciblés pendant toute la procédure et du nombre de répétitions (3 est recommandé par point temporel).
    note: La durée et le type de phas....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
acide acétiqueMerck5330010050Additif de phase mobile
acétonitrileAlchimie696-34967-4X2.5LSolvant HPLC
Acétate d’ammoniumMerck5330040050Additif de phase mobile
BENCHMIXER XL VORTEXER MULTITUBESBenchmark scientifiqueBV1010 (en anglaisMélangeur vortex
CasquettesPerlan TechnologiesRéférence 5183-2076Bleu scrw tp, pré-fente PTFE/Si spta, 100PK
chloroformeMerck1024441000
Cartouche Discovery HS F5 Supelguard, 3 μm, L × D.I. 2 cm × 2,1 mmMerckRéférence 567570-UColonne de garde HPLC
Discovery HS F5, 2,1 mm x 100 mm, 3 μmMerckRéférence 567502-UColonne HPLC
acide méthanoïqueAlchimie497-94318-50MLAdditif de phase mobile
Flacons en verrePerlan TechnologiesRéférence 5182-0714
HILIC Luna 3 μm, 200A, 100 x 2,0 mmShim-PolPHX-00D-4449-B0Colonne HPLC
HILIC SecurityGuard Cartouche, 3 μm, 4 x 2,0 mmShim-PolPHX-AJ0-8328Colonne de garde HPLC
IsopropanolAlchimie231-AL03262500Solvant HPLC
méthanolAlchimie696-34966-4X2.5LSolvant HPLC
Eau nano-pureMerck1037281002Solvant HPLC
Q Exactive Focus hybride quadripôle-Orbitrap MSThermo ScientificQ Mise au point ExactiveSpectromètre de masse
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm,100Å 100 x 2,1 mmMerck1506570001Colonne HPLC
SeQuant ZIC-HILIC Kit de protection 20 x 2,1 mmMerck1504360001Colonne de garde HPLC
Sondes à fibre optique SPME LC, mode mixteSupelcoFibres prototypes
Systèmes HPLC UltiMate 3000Thermo ScientificUltiMate 3000Système HPLC
Inserts de flacons (désactivés)Perlan TechnologiesRéférence 5181-8872
XSelect CSH C18 3,5 μm 2,1 x 75 mmeaux186005644Colonne HPLC
XSelect CSH C18 Cartouche VanGuard 3,5 μm, 2,1 x 5 mmeaux186007811Colonne de garde HPLC
)

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Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

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