Modèle murin d’obstruction urétérale unilatérale : une intervention chirurgicale pour obstruer le flux urinaire d’un rein dans des modèles murins

Résumé

Source : Yanai, K. et al. Évaluation quantitative par PCR en temps réel de l’expression des microARN dans un rein de souris présentant une obstruction urétérale unilatérale. J. Vis. Exp. (2020)

Cette vidéo montre la procédure de génération d’un modèle murin d’obstruction urétérale unilatérale. La procédure consiste à couper l’un des uretères de la souris pour obstruer l’écoulement de l’urine.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. La chirurgie UUO

1. Préparez les articles suivants : isoflurane, feuille de liège, crème dépilatoire, lingettes de laboratoire, boîte de Pétri avec PBS, soie 4-0, nylon 4-0, seringue de 2,5 ml, cotons-tiges, pince à épiler, ciseaux chirurgicaux et souris mâles C57BL/6 âgées de 8 semaines.
2. Anesthésier une souris avec 1,5 % d’isoflurane et maintenir à 1,5 %. Ensuite, appliquez une crème dépilatoire sur l'abdomen de la souris. Après quelques minutes, essuyez la crème dépilatoire avec une lingette de laboratoire imbibée de PBS.
3. Injectez de l'éthanol à 70 % dans l'abdomen de la souris et placez la souris en position couchée sur la feuille de liège.
4. À l’aide de ciseaux chirurgicaux et d’une pince à épiler, faites une incision dans la peau au niveau de l’abdomen et coupez le muscle et la membrane péritonéale de la vessie jusqu’au bord inférieur gauche des côtes.
5. Placez la seringue de 2,5 ml sous la souris. Prenez deux cotons-tiges et humidifiez-les avec du PBS. Tirez soigneusement les intestins sur le côté avec la pince à épiler et placez les écouvillons humidifiés de manière appropriée pour identifier l’uretère gauche. À l’aide de la pince à épiler, soulevez le rein gauche.
6. Utilisez la soie 4-0 pour ligaturer l’uretère gauche à deux endroits espacés d’environ 1 cm. Coupez l’uretère au centre des deux ligatures, puis utilisez des sutures en nylon 4-0 pour fermer la membrane péritonéale et l’incision.