Coupe de tissu cérébral de souris congelée : une procédure pour obtenir de fines sections de tissu congelé à partir de tissu cérébral murin congelé

Résumé

Source : Comba, A. et al. Microdissection par capture laser de sous-régions de gliome pour la caractérisation spatiale et moléculaire de l’hétérogénéité intratumorale, des oncoflux et de l’invasion. J. Vis. Exp. (2020)

Dans cette vidéo, nous montrons la section d’un tissu tumoral cérébral de souris congelé à l’aide d’un cryostat. Les coupes de tissu cérébral congelé ainsi obtenues sont stockées à basse température jusqu’à une analyse plus approfondie.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Sectionnement des tissus tumoraux cérébraux congelés

1. Étiquetez les lames de polyéthylène naphtalate (PEN) de 2 μm avec les informations de l’échantillon. Des coupes de tissus seront placées directement sur ces lames après la section.
2. Réglez la température de la chambre du cryostat entre -20 et -24 °C. Avant de sectionner, placez le bloc d’échantillon dans la chambre du cryostat et laissez-le s’équilibrer en fonction de la températ....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Lame de verre à membrane PEN (2 μm)	Lieca	1150518
Cryostat de recherche	Leica	CM3050s
Solution de décontamination RNaseZap RNase	Fisher Scientific	AM9780
Moules d’enrobage jetables Peel Away	Sciences de la microscopie électronique	Référence 70182
Une solution précise	Recherche Zymo	D3001-1
Composé Tissue-Plus O.C.T.	Fisher Scientific	Tél. : 23-730-571