Dissection du tissu du palais à partir d’un modèle murin adulte : une procédure chirurgicale pour prélever le palais dur et le palais mou de la cavité buccale d’une souris adulte

Résumé

Source : Xuan Ngo, Y. et al. Isolement et culture de kératinocytes oraux primaires du palais de souris adultes. J. Vis. Exp.(2021)

Cette vidéo montre une procédure chirurgicale visant à disséquer le tissu du palais à partir d’un modèle murin.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Dissection du tissu du palais d’une souris adulte

1. Sacrifier une souris C57BL/6J adulte (mâle ou femelle) par luxation cervicale conformément à la réglementation de l'établissement relative au bien-être animal.
   1. Retirez les poils autour de la bouche avec un rasoir. À l’aide de ciseaux, coupez de la joue vers la mâchoire, des deux côtés.
      note: La souris a besoin d’être anesthésiée avant d’être sacrifiée. Un mélange anesthésique de médétomidine, de midazolam et de butorphanol est utilisé (voir le tableau des matériaux).
2. Utilisez des pinces pour ouvrir grand la bouche et absorbez le sang à l’aide d’un coton-tige. Pour désinfecter le palais, essuyez l’intérieur de la bouche avec un coton-tige contenant 10 % de povidone iodée.
3. Pour prélever le palais de la souris, utilisez d’abord une lame de scalpel chirurgical pour faire une incision marginale de pleine épaisseur le long du côté du palais des dents maxillaires. Ensuite, disséquez soigneusement l’ensemble du palais à l’aide d’un raspatorium.
   note: Un raspatorium est un outil utilisé pour élever un lambeau mucopériosté (voir le tableau des matériaux) (Figure 1B).
4. Transférez rapidement le tissu du palais dans un tube de 15 mL contenant 4 mL de milieu complet + solution antibiotique-antimycosique. Conservez les mouchoirs sur de la glace jusqu’à ce qu’ils soient prêts pour l’incubation.
   note: Pour le prélèvement sur plusieurs souris, les tissus du palais peuvent être conservés sur de la glace jusqu’à 4 h.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Ciseaux à iris	Muromachi Kikai	Référence 14090-09
Médétomidine	Nippon Zenyaku Kogyo		Domitor
Le midazolam	Astellas Pharma		Dormicum
N°15 Scalpel jetable	plume	Référence 219AABZX00136000
Butorphanol	Meiji Seika Pharma		Vetorphale
Pince semi-courbée	Centre de recherche BRC Bio	PRI13-3376
Povidone iodée	Carré du Y	872612
Raspatorium #14	COMME UN	Référence 8-4599-01
Pinces fines	Centre de recherche BRC Bio	PRI13-3374
Antibiotique-Antimycosique 100x	Gibco	15240062
Tube conique stérile de 15 mL	Faucon	352096
coton	COMME UN	Tél. : 63-1452-97
Supplément de croissance défini EpiLife (EDGS)	Gibco	S0120