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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Imagerie de la souris enceinte
- Placez la souris en décubitus dorsal sur la plate-forme de surveillance. La souris reçoit en permanence un anesthésique isoflurane (entre 1,5 et 2,5 %) et de l’oxygène (1 L/min) via le cône nasal. Collez doucement toutes les pattes sur les coussinets de surveillance de la fréquence cardiaque sur la plate-forme.
- Appliquez 1 à 2 ml de gel de transmission d’ultrasons sur l’abdomen.
- À l’aide de la platine motrice manuelle, positionnez la sonde à ultrasons sur le bas-ventre.
- Localisez la vessie, qui devrait apparaître comme un cercle noir rempli de liquide juste à céphale de l’ouverture vaginale.
- Une fois la vessie localisée, déplacez très lentement la sonde pour visualiser l’utérus enceinte, qui devrait apparaître sous la forme d’un cylindre avec des zones rondes sur les sites de grossesse. Cela peut être décrit comme ressemblant à des perles sur une chaîne.
- Une fois que l’utérus de la grossesse a été identifié, commencez l’imagerie 2D.
2. L’imagerie par ultrasons 2D (Figure 1)
- Une fois que l’utérus de la grossesse a été identifié, commencez par le site de grossesse le plus proche de la vessie et déplacez lentement et séquentiellement les céphalades pour déterminer le nombre et l’emplacement des sites de grossesse.
- Si le rein, la rate ou le foie sont visualisés, repositionnez la sonde plus près de la caudale (plus près de la vessie) car l’utilisateur est allé trop loin céphalade.
- Imagez la corne utérine controlatérale de la même manière.
- Figez l’image lorsque le cadre de l’échographie se trouve au centre du site d’implantation/grossesse pour l’enregistrer pour une analyse et des mesures ultérieures.
REMARQUE : Il faut moins d’une seconde pour que l’image soit figée et enregistrée pour une analyse ultérieure.
- Mesurez la distance d’implantation en utilisant la réaction de décidualisation hyperéchogène comme marqueur en cliquant d’abord manuellement sur l’outil « mesurer », puis en cliquant sur l’emplacement d’un site d’implantation. Ensuite, faites glisser le curseur sur le site d’implantation suivant et cliquez pour tracer une ligne que l’ordinateur signalera automatiquement sa distance. Le logiciel indiquera ensuite la mesure manuelle. Cette étape n’est pas informatisée, mais demande à l’utilisateur de marquer la distance entre les sites décidualisés en traçant une ligne entre les sites décidualisés, pour laquelle le programme fournira une mesure.
- Mesurez la taille de l’implantation, la taille du sac gestationnel et la taille du pôle fœtal.