Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE
1. Implantation chirurgicale du système de surveillance télémétrique de la température
- À l’arrivée du vendeur, laissez les animaux se reposer dans le vivarium pendant au moins 1 semaine avant la chirurgie afin de minimiser le stress du transport.
- Hébergez les souris en groupe (maximum 5 par cage selon les directives locales de l’IACUC) jusqu’au jour de l’intervention chirurgicale pour l’implantation du dispositif télémétrique de température. Rangez-les dans des cages standard de 7,25 po (L) x 11,75 po (L) x 5 po (H) contenant de la litière d’épis de maïs. Maintenez le cycle d’éclairage sur un cycle d’éclairage 12 x 12 (allumé : 7 h ; éteint : 19 h). Maintenez la température du boîtier à 20-22 °C et l’humidité relative (HR) à 30-60 %. Fournir le régime alimentaire standard et de l’eau à volonté jusqu’au protocole EHS.
note: La raison d’être de l’hébergement individuel est d’éviter les blessures fréquentes causées par les combats chez les souris C57bl/6J mâles et de donner à chaque souris de nombreuses occasions de courir spontanément au volant.
- Pour la mise en place des dispositifs de télémétrie, anesthésie la souris avec de l’isoflurane (4 %, 0,4 à 0,6 L/min de flux d’O2) dans une chambre d’induction. Ensuite, placez la souris sous anesthésie continue via un cône nasal (1,5 %, 0,6 L/min).
- Utilisez un lubrifiant pour les yeux, comme une pommade vétérinaire, pour protéger les yeux de l'animal contre les dommages ou les blessures pendant la chirurgie.
- Pour préparer le site chirurgical, rasez le bas-ventre avec une tondeuse à poils pour petits animaux ou utilisez un épilateur disponible dans le commerce. Administrer la première dose de buprénorphine sous-cutanée (0,1 mg/kg) pendant cette période.
- Frottez la zone avec trois lavages de povidone iodée (ou un gommage germicide similaire) suivi d’un rinçage à l’alcool isopropylique à 70 % (ou d’une solution saline stérile selon les exigences vétérinaires locales). Ensuite, transférez la souris dans la zone chirurgicale.
- Utilisez un champ adhésif pour isoler le site chirurgical sur la souris. À l’aide d’instruments stériles et d’une technique aseptique, faites une incision de ~1 cm sur la ligne médiane le long de la ligne blanche, à environ 0,5 cm du bord costal. Ensuite, séparez la peau de la couche musculaire et faites une incision légèrement plus petite sur la linea alba, en prenant soin de ne pas endommager les intestins ou les organes internes.
- Une fois la couche musculaire ouverte, placez le télémètre stérile (appareil de radiotélémétrie miniature réutilisable sans pile ; 16,5 x 6,5 mm) dans la cavité intrapéritonéale devant les artères et les veines caudales et dorsale aux organes digestifs pour lui permettre de flotter librement.
note: Tous les télémètres sont nettoyés à l’eau et au savon, soigneusement rincés et stérilisés au gaz avec de l’oxyde d’éthylène entre les utilisations. Si la stérilisation au gaz n’est pas disponible, l’immersion dans des solutions de stérilisation (conformément aux recommandations du fabricant pour la dilution et le temps d’immersion) est acceptée pour désinfecter et stériliser les télémètres.
- Fermez l’ouverture abdominale à l’aide d’une suture résorbable stérile 5-0 et fermez la peau à l’aide d’un simple point interrompu avec une suture proline 5-0.
note: Permettre au télémètre de flotter dans le compartiment abdominal sans l’attacher à la paroi abdominale (une méthode recommandée par le fabricant) s’est avéré efficace et préféré par les auteurs pour éliminer l’excès de tension dans la paroi abdominale pendant la guérison. De plus, cela n'a aucun impact sur la capacité du récepteur à obtenir le signal de l'émetteur.
- Placez la souris dans sa cage propre avec un coussin chauffant portable sous la cage. Surveillez la souris toutes les 15 minutes pendant la première heure de récupération de l’anesthésie, puis retournez à l’animalerie.
