Perfusion cardiaque rétrograde de Langendorff : une technique ex vivo pour perfuser un cœur de souris isolé

Résumé

Source : Wu, K. et al. Modifications de la méthode Langendorff pour l’isolement simultané des myocytes auriculaires et ventriculaires de souris adultes. J. Vis. Exp. (2021)

Dans cette vidéo, nous effectuons la perfusion rétrograde de Langendorff d’un cœur de souris isolé. Au cours de la procédure, l’activité cardiaque du cœur est maintenue en le perfusant rétrogradement avec une solution de perfusion via les artères coronaires à l’aide d’une canule insérée dans l’aorte ascendante. Le modèle est utilisé pour étudier la physiopathologie cardiaque du cœur.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Préparation des appareils de solution et de perfusion

1. Assemblez un appareil Langendorff à débit constant (disponible dans le commerce ou fabriqué par vous-même). La figure 1 présente un schéma simple.
2. Préparez les solutions en fonction des réactifs indiqués dans les tableaux 1 et 2.
3. Allumez le bain-marie en circulation et ajustez une température d'entrée appropriée (42,7....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Monoxime de 2,3-butanedione (BDM)	Sigma-Aldrich	Référence 31550
CaCl2	Sigma-Aldrich	Réf. C4901
glucose	Sigma-Aldrich	G7528
HEPES	Sigma-Aldrich	N° H3375
Kcl	Sigma-Aldrich	P9333
KH2PO4	Sigma-Aldrich	Réf. P5655
KHCO3	Sigma-Aldrich	237205
MgCl2	Sigma-Aldrich	Référence M8266
MgSO4	Sigma-Aldrich	Référence M7506
Na2HPO4	Sigma-Aldrich	S7907
NaCl	Sigma-Aldrich	Réf. S7653
NaHCO3	Sigma-Aldrich	S5761
Pompe péristaltique	Pompe plus longue	BT100-2J
taurine	Sigma-Aldrich	Réf. T0625
Bain-marie	JULABO	DE (v.2)