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Article de méthode
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8 juillet 2025
Source : Omatsu-Kanbe, M. et al., An Antegrade Perfusion Method for Cardiomyocyte Isolation from Mice. J. Vis. Exp. (2021).
Cette vidéo décrit une technique de perfusion antérograde d’un cœur de souris isolé au cours de laquelle un perfusat est injecté à travers le ventricule gauche, et finalement, il perfore tout le myocarde. Cette méthode peut être utilisée pour isoler des cardiomyocytes à partir de modèles murins et générer des cœurs décellularisés pour d’autres applications en aval.
Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Perfusion antérograde du cœur de souris
REMARQUE : La pipette de transfert en plastique utilisée pour sucer le cœur doit être souple et ne pas être fortement effilée vers la pointe. Choisissez une petite pince vasculaire avec dentelure. Les instruments recommandés sont répertoriés dans la table des matériaux.
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Tube d’extension | Haut, Japon | X1 à 50 | Connectez-vous avec la seringue et l’aiguille d’injection pour une perfusion antérograde. |
| Tapis chauffant | Natsume Seisakusho, Japon | KN-475-3-40 | Équipement pour réchauffer la plaque de perfusion. |
| Pompe à perfusion | TERUMO, Japon | TE-311 | Pousse-seringue à perfusion pour perfusion antérograde. |
| Aiguille d’injection (calibre 27) | TERUMO, Japon | NN-2719S | Aiguille pour l’insertion dans le ventricule gauche. |
| Insuline (à partir du pancre bovin) | Sigma-Aldrich, États-Unis | I5500 | Dissoudre dans 0,1 M HCl. |
| Seringue en plastique (20 mL) | TERUMO, Japon | SS-20ES | Utilisation pour la perfusion de CIB-EGTA. |
| Pince vasculaire | Karl Hammacher GmbH, Allemagne | HSE 004-35 | Petite pince vasculaire droite utilisée pour le clampage de l’aorte. |
| Tous les autres réactifs | Nacalai Tesque, Japon |
