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Analyse du volume des ganglions lymphatiques inguinaux de souris : une technique d’imagerie par ultrasons à ultra-haute fréquence pour déterminer le volume des ganglions lymphatiques inguinaux dans un modèle murin

8 juillet 2025

Dans cet article

Résumé

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Source : Vitiello, M. et. al., Analyse du volume des ganglions lymphatiques par imagerie par ultrasons à ultra-haute fréquence dans le modèle murin génétiquement modifié de mélanome Braf/Pten. J. Vis. Exp. (2021)

Dans cette vidéo, nous démontrons la technique permettant d’imager le ganglion lymphatique inguinal dans un modèle murin à l’aide de l’imagerie par ultrasons à ultra-haute fréquence. Cette technique d’imagerie non invasive permet de suivre l’évolution du volume des ganglions lymphatiques chez l’animal au cours du temps.

Protocole

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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Procédure d’imagerie

  1. Placez la souris dans une chambre d’induction pour l’anesthésie gazeuse et fournissez 3 % d’isoflurane en oxygène pur jusqu’à ce que l’animal soit complètement anesthésié. Vérifiez la profondeur de l’anesthésie par l’absence de réponse au pincement de la patte.
  2. Transférez l’animal sur une planche chauffée - une partie constitutive de la station d’imagerie UHFUS - en maintenant l’animal en position couchée. Utilisez une sonde rectale lubrifiée avec de la vaseline pour mesurer la température corporelle. Ajustez la température de la planche pour maintenir la température corporelle de la souris dans la plage physiologique (36 ± 1°C).
  3. Humidifiez les yeux de la souris avec une pommade vétérinaire pour éviter la sécheresse pendant l'anesthésie. Fournir du gaz narcotique (1,5 % d'isoflurane dans de l'oxygène pur) à travers le masque nasal d'une souris. Ajustez le pourcentage d’isoflurane pour maintenir la bonne profondeur d’anesthésie.
  4. Enduire les pattes avant et arrière de pâte conductrice et les coller sur les électrodes de la plaque ECG intégrées dans la carte. Vérifiez que les paramètres physiologiques (fréquence cardiaque, signal respiratoire et température corporelle centrale) sont correctement acquis et affichés.
  5. Retirez les poils des deux zones inguinales en appliquant un agent dépilatoire et enduisez-les d’un milieu de couplage acoustique.
  6. Fixez la sonde linéaire UHFUS (fréquence centrale de 40 MHz) dans un moteur 3D spécialisé intégré à la station d’imagerie UHFUS, permettant un mouvement automatisé et progressif de la sonde.
  7. Orienter et ajuster correctement la position de la sonde à ultrasons pour obtenir des images à court axe du ganglion lymphatique inguinal (gauche/droite), et placer la région d’intérêt dans la zone focale.
  8. Scannez tout le volume du ganglion lymphatique inguinal sous la forme d’une séquence d’images 2D en mode B, comme décrit précédemment. Acquérez des images à plusieurs niveaux du ganglion lymphatique par mouvement linéaire du transducteur avec des tailles de pas à l’échelle micrométrique, pour générer des données 3D en termes de boucles ciné automatiquement dépendantes de la respiration et du cœur.
  9. Réglez l’enregistrement d’image avec les paramètres suivants : distance de balayage comprise entre 2 et 5 mm (selon la taille des ganglions lymphatiques) ; taille du pas 44 μm, avec un résultat de 46 à 114 pas de balayage/coupes de ganglions lymphatiques et un temps d’acquisition de 1 à 3 min par animal. Stockez numériquement les images acquises au format brut (DICOM) pour des analyses ultérieures hors ligne.

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Déclarations de divulgation

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Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
N° B6. Cg-Braftm1Mmcm Ptentm1Hwu Tg(Tyr-cre/ERT2)13Bos/BosJ (Braf/Pten) sourisLe Laboratoire JacksonRéférence 13590
Gel bleuSooft IaliaGel de solution ophtalmique
IsoFlo (isoflorane)ZoetisLiquide pour anesthésie gazeuse
Gel SigmaParkerGel d’électrode
Gel transsonique transparentTelic SAUGel à ultrasons
VétérinaireReckitt Benckiser ITCrème dépilatoire
Système compact à double anesthésieFujifilm, Visualsonics Inc.Système d’anesthésie à base d’isoflurane équipé d’un cône nasal et d’une chambre d’induction
MX550SFujifilm, Visualsonics Inc.Sonde linéaire UHFUS
Vevo 3100Fujifilm, Visualsonics Inc.Système UHFUS
Station d’imagerie VevoFujifilm, Visualsonics Inc.Station d’imagerie UHFUS et unité de surveillance physiologique avancée dotée d’un panneau chauffant
Laboratoire Vevo Fujifilm, Visualsonics Inc.Plate-forme logicielle pour le post-traitement des images échographiques

Réimpressions et autorisations

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Mots-clés

Imagerie ultrasonore 3Dimagerie en mode Bbalayage par transducteurmonitorage physiologiquesouris anesth si ecouplage acoustique

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