Induction chirurgicale de l’instabilité de la colonne lombaire dans un modèle murin : une procédure chirurgicale pour la résection des apophyses épineuses lombaires et des ligaments connectés dans un modèle murin

Résumé

Source : Liu, S. et al. Un modèle murin d’instabilité de la colonne lombaire. J. Vis. Exp. (2021)

Dans cette vidéo, nous décrivons l’intervention chirurgicale visant à induire l’instabilité de la colonne lombaire dans un modèle murin en réséquant l’apophyse épineuse lombaire L3 à L5 ainsi que les ligaments supraépineux et interépineux.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Préparation préopératoire

1. Stérilisation des instruments : Stérilisez les instruments chirurgicaux à la vapeur dans un autoclave (121 °C pendant 15 min) avant l’opération. Emballez les instruments dans un contenant métallique et conservez-les jusqu’à ce qu’ils soient utilisés dans la chirurgie.
2. Configuration de la plate-forme chirurgicale : Attribuez une zone de paillasse d’au moins 60 cm x 60 cm pour l’opération. Nettoyez la surface de la zone avec de l’alcool à 75 % et couvrez avec une serviette médicale jetable. Placez un paquet d’instruments chirurgicaux stériles, de réactifs, d’articles chirurgicaux sur une serviette médicale jetable dans le 1/3 supérieur de la zone. Laissez les 2/3 restants de la zone propre pour l’opération chirurgicale. Ajoutez un coussin chauffant sous le coussin chirurgical pour un soutien thermique.
3. Préparation des animaux
   1. Placez l’animal (souris C57BL/6J, mâle, âgé de 8 semaines) dans la chambre d’induction. Allumez le vaporisateur à un niveau d’induction de 4 % pour l’isoflurane et de 4 L/min pour l’oxygène. Une fois que l’animal est complètement anesthésié, maintenez l’anesthésique avec le cône nasal et l’administration de l’anesthésique à un niveau de 1,5 % pour l’isoflurane et de 0,4 L/min pour l’oxygène pendant la chirurgie. Surveillez la respiration de l’animal.
   2. Appliquez une pommade oculaire au chlorchlorhydrate de chlortétracycline pour prévenir la sécheresse cornéenne pendant la chirurgie.
   3. Rasez la zone chirurgicale sur la surface dorsale de la région thoracique inférieure jusqu’au haut de la région sacrée à l’aide d’une tondeuse pour petits animaux. Retirez la fourrure rasée avec des lingettes en tissu.
   4. Appliquez la crème dépilatoire sur la zone rasée et laissez-la là pas plus de 3 min. Retirez la crème avec de la gaze et rincez avec 2 ml de sérum physiologique stérile à 0,9 %.
   5. Placez un coussinet cylindrique chirurgical sur mesure (Figure 1A) sous l’abdomen de la souris pour remonter la colonne lombaire et faciliter l’opération chirurgicale.

2. Exposition du tiers lombaire à la cinquième lombaire (L₃–L₅) apophyses épineuses

1. Utilisez l’index pour toucher les apophyses épineuses sous-cutanées des vertèbres lombaires, qui sont plus vers l’extérieur, et comparez avec les vertèbres thoraciques et les vertèbres sacrées pour identifier la région lombaire.
2. Rincez la peau avec de l’alcool à 75 %. Effectuez une incision cutanée de 3 à 4 cm sur la région du bois, de la région mi-thoracique à la hanche, à l’aide d’une lame de scalpel pour exposer le fascia.
3. Identifiez la colonne lombaire par la morphologie du fascia postérieur inséré sur les extrémités des apophyses épineuses. Dans le détail, les fascias du troisième lombaire (L₃) au premier fascias sacré (S₁) se distinguent des autres fascias par leur forme en « V ». La dernière extrémité en « V » se connecte au premier aponévrose sacré (S₁) et la première extrémité en « V » correspond à l’apophyse épineuse L₃ (Figure 1B).
4. Faites les incisions du muscle paraépineux postérieur le long des apophyses épineuses de L₃ à L₅ des deux côtés latéralement avec une lame de scalpel (Figure 1C). Contrôlez la profondeur de l’incision vers les facettes pour réduire l’hémorragie.
5. Séparez les couches musculaires à l’aide de deux pinces ophtalmiques pour exposer les apophyses épineuses L₃ à L₅ et les ligaments supra-épineux.

3. Résection des apophyses épineuses L ₃–L₅ avec les ligaments

1. Séparez les apophyses épineuses individuelles en coupant les ligaments interépineux à l’aide de cisailles de Vénus (Figure 1D).
2. Réséquez les apophyses épineuses L_{3-L 5} ainsi que les ligaments interépineux avec cisaillement de Vénus (Figure 1E).
3. Suturez l’incision cutanée avec de la soie stérile tressée (taille de suture 5,0) sans rattachement des muscles paravertébraux.
4. Appliquez la pommade oculaire au chlorchlorhydrate de chlortétracycline sur le site chirurgical.

Résultats

Figure 1 : Exposition des apophyses épineuses L3-L5 et fonctionnement de la LSI. (A) Un coussinet cylindrique sur mesure est placé sous l’abdomen de la souris. (B) Exposition des fascias lombaires et identification des apophyses épineuses de L3 à S1 par des formes en « V ». (C) Incisions latérales du muscle paraépineux des deu...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Pommade oculaire au chlorhydrate de chlortétracycline	Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.	H31021931	Prévenir la sécheresse oculaire, Prévenir l’infection de la plaie
C57BL/6J souris mâles	Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)	SCXK2018-0004	Modèle animal
Serviette médicale jetable	Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.	20160090	Plate-forme pour opération chirurgicale
Équipement d’anesthésie par inhalation	MILIEU	Matrx 3000	anesthésie
L’isoflurane	Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.	1903715	anesthésie
Chlorhydrate de lidocaïne	Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.	H37022839	Soulagement de la douleur
Aiguille de suture médicale	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	Référence 20S0401J	Suture de la peau
Pince ophtalmique	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Usine d’instruments chirurgicaux	JD1050	Clipser la peau
Ciseaux ophtalmiques (10cm)	Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Usine d’instruments chirurgicaux	N° Y00030	Incision cutanée
Soie tressée	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	Référence 11V0820	Suture de la peau
Tondeuse pour petits animaux	Shanghai Feike Electric Co., Ltd.	Référence FC5910	épilation
Lames chirurgicales stériles (12#)	Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.	Référence 35T0707	Incision musculaire
Crème dépilatoire Veet	RECKITT BENCKISER (Inde) Ltd	Na	épilation
Cisailles Vénus	Équipement médical Mingren	Longueur :12.5cm	Clipser le muscle et l’apophyse épineuse