Modélisation de l’occlusion trachéale fœtale transutérine dans un modèle murin : une procédure chirurgicale pour la ligature de la trachée fœtale chez une souris enceinte

Dans cet article

Résumé

Source : Aydın, E. et al. Modèle d’occlusion trachéale fœtale transutérine chez la souris. J. Vis. Exp. (2021)

Cette vidéo montre la procédure d’occlusion trachéale transutérine d’un fœtus de souris chez une souris enceinte. Ce modèle peut être utilisé pour étudier l’impact de la trachée occluse sur le développement pulmonaire.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Laparotomie

Nettoyez la surface abdominale avec de l’alcool et de la povidone iodée. Maintenir des conditions stériles tout au long de l’opération.
Effectuer une incision verticale pour la laparotomie des mères enceintes. Coupez toutes les couches séparément.
Identifiez les cornes utérines de chaque côté.
Déterminer les fœtus candidats à la chirurgie.
note: N’opérez pas les fœtus les plus proches du vagin.
Opérer deux fœtus dans chaque corne utérine s’il y a un nombre pair de fœtus de chaque côté (4 la plupart du temps), et 1 fœtus dans chaque corne utérine s’il y a un nombre impair de l’utérus (3 la plupart du temps).

2. Occlusion trachéale (TO)

Utilisez des lunettes de grossissement 2,5x pour la visualisation.
Positionnez la corne utérine de manière transversale.
Prenez les petits, tournés vers le haut, entre deux doigts en utilisant les yeux des petits et la queue comme guide pour positionner le fœtus.
Appliquez une légère pression sur la tête du chiot pour permettre l'extension de la tête et donc, la visualisation du cou.
Utilisez une suture en polypropylène 6.0 avec une aiguille atraumatique pour effectuer l’OT (Figure 1). Gardez le placenta sur le côté et loin des points d’entrée et de sortie de l’aiguille.
Insérez l’aiguille transversalement à travers le côté de l’utérus loin du placenta à travers la partie antérieure du 1/3^du cou.
Déplacez doucement l’aiguille jusqu’à la ligne médiane du cou et dirigez-la vers la partie antérieure, puis sortez du cou entre la trachée et à l’opposé de la gaine carotide et de l’utérus.
Noeudez la suture en prenant soin de maintenir l’intégrité des membranes et de la paroi utérine, et gardez le cordon ombilical en sécurité pendant le nouage.

3. Fermeture de la paroi abdominale

Replacez la corne utérine dans l’abdomen.
Injecter 2 mL de solution saline stérile chaude dans la cavité péritonéale avant de la fermer.
Mettez une suture polyglactine 5/0 pour fermer la paroi abdominale et fermez la peau avec une suture en soie non courante.
Appliquer 0,1 mg/kg de buprénorphine par voie intrapéritonéale pour l’analgésie, et permettre la récupération de la digue dans un incubateur chaud.

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Résultats

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Graphique 1. Occlusion trachéale. (A) La suture transutérine passant par le cou. (B) Représentation schématique des structures après le passage de la suture à travers et avant le nœud. Abréviations : C = artère carotide ; J = Veine jugulaire ; T = trachée ; E = œsophage ; V = Vertèbre.