Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Pour permettre aux lapins de s’acclimater dans les dispositifs de contention et pour que l’enquêteur puisse confirmer objectivement la stabilisation des fréquences cardiorespiratoires, instrumentez tous les lapins avec les capteurs cardiorespiratoires et neuronaux et effectuez une surveillance vidéo continue pendant > 1 heure, 1 à 3 fois par animal.
2. Expérience de médication intraveineuse (Pentylènetétrazol, PTZ)
- Pour visualiser la veine marginale de l'oreille, rasez la surface postérieure de l'oreille du lapin. Utilisez une lingette à l’éthanol à 70 % pour désinfecter le site et dilater la veine marginale de l’oreille. Ceci est indiqué par l’ovale pointillé noir de la figure 1F.
- À ce stade, demandez à un expérimentateur de couvrir le visage du lapin avec sa main pour réduire le stress de la procédure pour le lapin. Un deuxième expérimentateur canule soigneusement la veine marginale de l’oreille à l’aide d’un angiocathéter stérile de 25 G.
- Une fois le cathéter dans la veine, placez un bouchon d’injection stérile à l’extrémité du cathéter afin qu’une aiguille puisse introduire le médicament par voie intraveineuse. L’emplacement du bouchon d’injection est indiqué par un cercle bleu sur la figure 1G.
- Fabriquez une attelle en enveloppant une gaze de 4 x 4 pouces avec du ruban adhésif afin qu'elle forme un tube et en la plaçant à l'intérieur de l'oreille du lapin. Ensuite, collez l’attelle sur l’oreille de manière à ce que le cathéter soit fixé en place et reste droit, comme l’oreille non cathétérisée.
- Injecter 1 mL de 10 unités USP par mL de solution saline héparinisée.
note: Le cathéter et le vaisseau doivent être visiblement débarrassés de l’air et rester perméables. Si le cathéter n’est pas dans le vaisseau, la seringue ne poussera pas facilement et il y aura une accumulation de solution saline dans le tissu sous-cutané.
- Donnez aux lapins des doses progressives de PTZ par voie intraveineuse de 1 mg/kg à 10 mg/kg par incréments de 1 mg/kg toutes les 10 min. Notez au début de chaque dose l’animal qui reçoit l’injection et la concentration du médicament.
note: Cela permet d’évaluer les effets aigus et additifs de l’administration de PTZ. Alternativement, pour évaluer davantage les effets chroniques du PTZ à faible dose, le lapin reçoit des doses répétées à chaque concentration à faible dose, 7 doses à 2 mg/kg, 3 doses à 5 mg/kg, puis 3 doses à 10 mg/kg, chaque dose est séparée de 10 min.
- Après chaque dose, surveiller attentivement la vidéo-EEG-ECG-capnographie-oxymétrie pour détecter toute anomalie neurocardiaque, électrique et respiratoire et des signes visuels d’activité épileptiforme. Notez ces changements en temps réel et lors de la post-analyse.
note: L’activité convulsive commence souvent dans les 60 secondes suivant l’administration du PTZ.
