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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Accès intravasculaires
REMARQUE : Les accès intravasculaires doivent être établis dans la veine jugulaire externe droite, la veine jugulaire externe gauche, l’artère carotide gauche, l’artère fémorale gauche et la veine fémorale droite. Chez le porc, la veine jugulaire externe est beaucoup plus grande que la veine jugulaire interne et, par conséquent, plus facile d’accès. Tous les matériaux nécessaires à cette section sont illustrés à la figure 1A.
- Rasez l’animal aux sites de ponction pour les accès intravasculaires.
- Désinfectez la peau avec de la chlorhexidine (ou de la povidone iodée) et essuyez-la avec de l’alcool isopropylique. Répétez l’opération pour deux cycles supplémentaires.
- Placez un champ stérile sur la zone désinfectée avec un trou situé au centre du couvercle.
- Utilisez un appareil à ultrasons avec une sonde linéaire. Couvrez la sonde avec un couvercle stérile et utilisez du gel stérile pour l’examen vasculaire.
- À l’aide d’un cathéter veineux stérile de 17 G, perforez la peau et guidez l’aiguille jusqu’au positionnement intravasculaire par ultrasons (figures 1B et C).
- Remplacez l’aiguille par un fil-guide en utilisant la technique Seldinger. Retirez le cathéter veineux en ne laissant que le fil-guide dans la lumière intravasculaire. Ensuite, faites une petite incision cutanée (~5 mm) adhérente au fil-guide pour faciliter l’insertion de la gaine.
- Placez une gaine française de 8 (F) sur le fil-guide et dans le récipient de votre choix (technique Seldinger). Choisissez une gaine 8F dans la veine jugulaire externe droite (pour le cathétérisme cardiaque droit) et dans l’artère carotide gauche (pour le cathéter à anse VG PV). Une lumière suffisante est nécessaire pour éviter d’endommager les cathéters.
- Placez une gaine 7F dans la veine jugulaire externe gauche.
- Placez une gaine 7F dans l’artère fémorale gauche. L’accès est destiné à la mesure invasive de la pression artérielle et à l’échantillonnage des gaz du sang.
- Placez une gaine de 12F (ou 14F si disponible) dans la veine fémorale droite pour l’insertion du ballonnet de la veine cave inférieure (VCC). Envisagez d’utiliser un dilatateur en deux étapes pour les plus grandes gaines.
- Confirmez et contrôlez le positionnement de toutes les gaines en prélevant du sang (veineux ou artériel, respectivement) et en rinçant facilement avec une solution saline isotonique. Les gaines sont correctement positionnées à l’intérieur d’un vaisseau sanguin si l’on peut prélever du sang sans résistance.
- Fixez toutes les gaines avec une suture cutanée (taille 3.0) pour éviter tout retrait accidentel d’une gaine. Les sutures cutanées seront retirées après la fin du protocole, en même temps que le retrait des gaines.
- Connectez l’accès artériel fémoral au transducteur de pression et calibrez en fonction de la pression atmosphérique. Assurez-vous que cette configuration génère la forme correcte de la courbe de pression artérielle.
- Prélevez un échantillon de sang artériel à partir d’une gaine artérielle et analysez-le sur un appareil d’échantillonnage de sang artériel pour évaluer le pH, la pression partielle artérielle de dioxyde de carbone (PaCO2) et d’oxygène (PaO2, selon votre FiO2 choisi), ainsi que les taux d’hémoglobine, d’électrolytes, de glucose sanguin et de lactate.
- Corrigez les électrolytes et la glycémie, si nécessaire, aux valeurs standard par perfusion du produit nécessaire. En particulier, envisagez la correction des niveaux de potassium car les perturbations du potassium peuvent augmenter le risque d’arythmogenèse déclenchée par l’instrumentation.
- Si le porc était à jeun avant l’expérience, envisagez une perfusion en bolus de solution saline isotonique (10 ml/kg perfusée pendant 30 à 60 min) ou d’un cristalloïde similaire pour contrer l’hypovolémie.
- Envisagez une perfusion continue de solution saline isotonique de 4 mL/kg/h pour contrer la transpiration tout au long du protocole.
REMARQUE : L’expérience peut être interrompue à cette étape.
2. Cathétérisme cardiaque droit
- Rincez un cathéter Swan Ganz avec une solution saline et assurez-vous que le ballonnet se gonfle correctement.
- Connectez les ports du cathéter Swan Ganz aux transducteurs de pression. Réinitialisez la pression à la pression atmosphérique en maintenant les deux orifices de pression (pour la pression artérielle pulmonaire et la pression veineuse centrale, respectivement) au niveau axillaire moyen du porc.
- Insérez le cathéter Swan Ganz à travers la gaine 8F dans la veine jugulaire droite.
ATTENTION : Des tabliers en plomb ou une protection similaire doivent être portés lors de l’utilisation de la fluoroscopie.
- Observez à la fluoroscopie quand la partie distale du cathéter Swan Ganz est hors de la gaine. Gonflez le ballon avec la seringue associée.
REMARQUE : Le gonflage du ballon Swan Ganz à l’intérieur de la gaine endommagera le ballon. La vue antéro-postérieure de la fluoroscopie est suffisante pour toutes les procédures décrites.
- Faites avancer le cathéter Swan Ganz lentement en suivant ses mouvements à la fluoroscopie. Des progrès plus lents permettront au flux sanguin de guider le cathéter.
- Observez les changements dans le signal de pression de l’orifice distal lorsqu’il pénètre dans le VD et peu après l’artère pulmonaire (Figure 2). Assurez-vous que le cathéter avance sans aucune résistance.
- Assurez-vous que la pression passe de 5 à 8 mmHg dans la circulation veineuse centrale à 20 à 30 mmHg dans la systole et à 0 à 5 mmHg en diastole dans le VD. Après avoir passé les valves pulmonaires, la pression diastolique sera de 10 à 15 mmHg (voir la figure 2 pour les changements de forme du signal de pression).
REMARQUE : Des pressions systoliques dans le VD et dans l’artère pulmonaire supérieures à 40 (ou une pression artérielle pulmonaire moyenne supérieure à 25) peuvent être un signe d’hypertension pulmonaire due à une infection pulmonaire chez l’animal. N’oubliez pas que la ventilation mécanique à pression positive peut également augmenter la pression artérielle pulmonaire.
- Dégonflez le ballonnet et assurez-vous que l’orifice de pression distal est toujours dans l’artère pulmonaire principale. Utilisez à la fois la fluoroscopie et le signal de pression pour cette vérification.