Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Implantation d’une tumeur hépatique par laparotomie
- Préparez le lapin receveur pour la laparotomie. Anesthésier le lapin receveur à l’aide de 45 mg/kg de kétamine et de 5 mg/kg de xylazine pour l’induction, suivi d’une intubation et d’un entretien avec 1 à 3 % d’isoflurane au besoin. Lorsque le lapin est anesthésié, rasez le site chirurgical à l’aide d’une tondeuse à cheveux. Nettoyez la zone d’incision à l’aide d’un lavage en trois exemplaires avec un gommage à la bétadine, une solution d’éthanol à 70 % et une solution de bétadine, et drapez l’abdomen de manière chirurgicale stérile.
- À l'aide d'une lame #15, amorcez la laparotomie en faisant une petite incision verticale vers le bas à travers la peau du lapin à partir du processus xiphoïde. Cela devrait être facilement palpé et a tendance à avoir à peu près la taille d’un penny américain. Voir la figure 1.
- Refléter la peau et identifier la linea alba. Il doit s’agir d’une bande blanche réfléchissante de tissu se déplaçant vers le bas sur la ligne médiane. Utilisez une dissection émoussée pour traverser la ligne blanche et exposer le péritoine. Voir la figure 2.
note: Le péritoine est facilement identifiable puisqu’il recouvre directement l’intestin, que l’on peut voir bouger avec la respiration.
prudence: Le péritoine a tendance à adhérer à l’intestin sous-jacent en raison de la tension superficielle. L’utilisation d’un traumatisme contondant pour disséquer la linea alba aide à dissiper le risque de perforation de l’intestin sous-jacent.
- Une fois le péritoine exposé, disséquez-le soigneusement pour entrer dans la cavité péritonéale. Le foie peut maintenant être identifié. Pour mieux naviguer dans l’espace abdominal, étendez l’incision médiane de 1 à 2 cm vers le bas à travers la peau, les muscles et le péritoine.
note: L’extension de l’incision médiane peut être réalisée facilement et en toute sécurité en insérant soigneusement un hémostat incurvé dans l’espace péritonéal, l’extrémité incurvée faisant face superficiellement vers le péritoine. Ensuite, ouvrez légèrement l’hémostat et utilisez une lame pour couper le tissu entre les deux bras de l’hémostat.
- Identifier le lobe gauche du foie afin de sélectionner un site pour l’implantation de la tumeur. Le lobe gauche est inféro-latéral au lobe médial qui se trouve sur la ligne médiane.
- Avant d’essayer de faire sortir le foie de l’espace péritonéal, placez un morceau de gaze sec sur la face inférieure de l’incision.
note: La gaze fournira une surface adhérente sur laquelle poser le foie pour l’empêcher de se rétracter dans l’abdomen.
- À l’aide d’une pince atraumatique ou d’un morceau de gaze humide sur les doigts, retirez soigneusement le lobe gauche du foie de l’abdomen à travers l’incision et posez-le sur la gaze sèche placée plus tôt. Voir la figure 3.
prudence: La capsule hépatique est sensible et peut facilement se rompre. Il est essentiel d’être doux lors de la manipulation de cet organe pour prévenir les saignements capsulaires, les ecchymoses hépatiques et/ou l’hémopéritoine.
note: Habituellement, le foie se déclare visuellement en entrant dans l’espace péritonéal ; Cependant, si l'estomac du lapin est distendu, le foie peut être poussé crânienne hors de vue. Si c’est le cas, soulevez doucement la paroi abdominale à l’aide d’une sonde émoussée. Dans ce scénario, le foie a tendance à adhérer à la face ventrale du diaphragme en raison de la tension superficielle, alors séparez soigneusement le foie à l’aide d’une sonde émoussée et il devrait se détacher. Ensuite, utilisez des pinces atraumatiques pour retirer le foie.
- À ce stade, préparez le tissu tumoral pour l’implantation et placez un morceau de gaze humide sur le foie pour le protéger.
- Sélectionnez un morceau detissu tumoral prétraité de 1 à 3 mm pour l’implantation dans le foie. Voir la figure 4.
- À l’aide d’une lame #11, percez le tissu hépatique à un angle de 45° en créant une poche de 0,5 cm de profondeur, en prenant soin de ne pas pénétrer la face dorsale de la capsule hépatique. Laissez la lame en place après avoir fait la perforation. Voir la figure 5.
- Soulevez doucement la lame dans le sens ventral pour créer une petite poche dans le lit du foie. Prenez le morceau de tumeur à l’aide d’une pince, placez le morceau de tumeur dans cette poche puis retirez la lame.
note: La lame peut être retirée avant d’insérer le morceau de tumeur, cependant, le foie saignera et cela peut obscurcir le site de ponction, ce qui le rend difficile à identifier.
prudence: Assurez-vous de minimiser le contact de la tumeur avec d’autres structures pour éviter l’ensemencement involontaire de la tumeur. Cela peut également être évité en mettant de côté tous les outils utilisés pour aider à l’implantation par la suite.
- À ce stade, placez un morceau d’agent hémostatique, tel que de la mousse de gel, sur la poche tumorale pour favoriser l’hémostase et empêcher l’éjection du morceau tumoral.
- Renvoyez le foie dans l’abdomen, une fois que l’hémostase est confirmée.
- Fermez la paroi abdominale avec une suture en polydioxanone 3-0 sur une aiguille conique à l’aide d’un simple point continu et fermez la peau avec des sutures 4-0 polyglactin 910 sur une aiguille coupante à l’aide d’un point sous-cutané continu.
prudence: Lors de la fermeture de la paroi abdominale, veillez à ne pas endommager l’épiploon ou d’autres structures intestinales lors d’un jet de suture.
