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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Arrivée et acclimatation des animaux
- Mettre en quarantaine les porcelets de 1 à 2 jours pendant au moins 24 heures après leur arrivée.
- Hébergez les porcelets dans des cages en acier inoxydable propres et désinfectées (36 po x 48 po x 36 po) sur de la litière à copeaux de tremble et nourrissez-les ad libitum avec un substitut de lait de porc.
- Maintenez la température ambiante à 85 °F pour assurer un environnement thermo-neutre.
2. Jour de l’expérience
- Retirez la nourriture 2 h avant l’expérience.
- Injecter chez les porcelets une injection intramusculaire de kétamine (10 à 40 mg/kg) et de xylazine (1,5 à 3,0 mg/kg IM) et les transporter via une cage de transport vers l’espace chirurgical.
3. Induction et maintien de l’anesthésie
- Administrer un anesthésique d’inhalation d’isoflurane à 4 % mélangé à de l’oxygène par cône nasal et confirmer que l’animal est profondément anesthésié en évaluant l’absence de réflexes palpébraux et de sevrage.
- Intubez l’animal en le plaçant en position couchée et utilisez un laryngoscope (lame droite) pour aider à guider le tube d’intubation (diamètre 2,5 à 2 mm) dans la trachée.
- Placez l’animal sur le ventilateur une fois que le tube d’intubation est fixé.
- Assurez-vous que les porcelets reçoivent un mélange d’isoflurane (0,25 % à 3 % d’entretien), d’oxygène et de protoxyde d’azote.
- Fournir une dose de fentanyl (10 μg/kg) et continuer à administrer une dose toutes les 1 à 2 heures pour assurer une profondeur adéquate et continue de l’analgésie et de la sédation et pour éviter les artefacts de mouvement qui pourraient risquer de déloger la sonde endotrachéale.
- Établir un accès intraveineux (IV) dans la veine abdominale sous-cutanée ou toute autre veine périphérique.
- Établissez le cathéter artériel à travers l’artère fémorale. Cela peut être fait de manière non invasive ou en effectuant une réduction.
4. Chirurgie du plexus brachial
- Placez l’animal en position couchée sur la table d’opération après une anesthésie appropriée comme décrit dans la section 3, avec le membre supérieur en abduction, en exposant la région axillaire.
- Utilisez n’importe quel champ chirurgical pour couvrir l’animal. Utilisez des techniques propres mais non stériles.
- Exposez le complexe du plexus brachial des deux côtés de la colonne vertébrale en faisant une incision médiane (à l’aide d’une lame #10) sur la peau et le fascia recouvrant la trachée, jusqu’au tiers supérieur du sternum, correspondant aux niveaux de la colonne vertébrale entre C3 et T3.
- Extrapoler l’incision à l’aide de la pince et de l’hémostat horizontalement de chaque côté à partir de l’encoche suprasternale le long du bord de la clavicule jusqu’au haut du bras, tout en épargnant les veines céphaliques et basiliques.
- Relâchez les volets supérieur et inférieur par dissection contondante à l’aide de ciseaux et de pinces, permettant d’accéder aux régions cervicale et thoracique du plexus brachial, respectivement.
- Identifiez l’axe (C2) et la première nervure au niveau du T1. À l’aide de ces repères, identifiez les trois cervicales inférieures (C6-C8) et le premier foramen vertébral rachidien thoracique (T1), puis examinez soigneusement le plexus pour localiser les bifurcations des divisions (forme en M) afin d’obtenir une exposition.
- Étiquetez (à l’aide de boucles nerveuses) les régions du plexus brachial au-dessus de ces bifurcations plus proches de la colonne vertébrale comme racine/tronc et étiquetez celles en dessous de ces bifurcations comme des cordes suivies du nerf, qui sont situés plus près du bras.