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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Anesthésie et intubation
- Sédater les animaux (lapins blancs de Nouvelle-Zélande âgés de trois mois (mâles ou femelles), pesant ~2,5 kg chacun) par injection intramusculaire (IM) de kétamine (25 mg/kg, 50 mg/mL, 0,5 mL/kg) + xylazine (3 mg/kg, 20 mg/mL, 0,15 mL/kg). Attendre ~20 min que les animaux dorment
profondément (atonie musculaire complète).
note: Cette prémédication permettra un processus d’intubation simple, rapide et indolore. Une analgésie et une anesthésie profondes sont induites comme décrit à l’étape 1.1.8.
- Insérez une canule intraveineuse (IV) dans la veine marginale de l’oreille et maintenez-la fermée jusqu’à ce que l’intubation soit terminée.
note: Cette ligne IV servira à perfuser le fentanyl et le propofol pour l’analgésie profonde et l’anesthésie, respectivement (voir étape 1.8).
- Maintenez l’anesthésie en fournissant 5 % de sévoflurane dans de l’oxygène pur jusqu’à ce que l’intubation soit effectuée.
note: Cette étape n’est nécessaire que si l’animal présente des signes de réveil (mouvements oculaires, contractions musculaires).
- Anesthésier la trachée localement en vaporisant 10 % de lidocaïne. Placez le lapin en position couchée et maintenez sa tête en extension verticale.
- Faites glisser le premier tube endotrachéal de petit diamètre (2,5 mm) dans la trachée du lapin jusqu’à ce que l’on entende un flux d’air dans le tube. Cela ouvrira le larynx et facilitera l’insertion du tube définitif.
- Insérez un guide (cathéter d’intubation) dans le tube pour fixer la position du tube dans la trachée. Retirez le tube de petit diamètre et glissez le tube endotrachéal définitif (4,9 mm) sur le guide.
- Retirez le guide et gonflez le ballonnet à l’extrémité de la sonde endotrachéale pour sceller et bloquer le dispositif dans la trachée. Le tube restera en place, mais il peut être fixé à l’aide d’un lacet noué autour du front. Aérez immédiatement (7 ml/kg, fréquence de 40/min) l’animal avec 3 % de sévoflurane dans de l’oxygène pur.
- Perfuser en continu (veine de l'oreille) du fentanyl (0,01 mg/mL, 2 à 4 mL/h) pour induire l'analgésie, 2 à 4 mg/kg de propofol (2 %) (20 mg/mL, 4 à 8 mL/h) pour induire l'anesthésie, et 4 mL/kg/h d'acétate de Ringer pour maintenir des conditions iso-volumétriques.
- Placez une sonde de température rectale. Surveillez également la fonction cardiaque, la température et la saturation en oxygène tout au long du processus.
- Contrôlez la profondeur de l’anesthésie en surveillant la respiration autonome ; si l’animal montre des signes de respiration autonome, distribuez un petit bolus de propofol et de fentanyl.