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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Préparation de modèles d’infection osseuse
- Conservez les lapins blancs de Nouvelle-Zélande mâles, âgés de 3 mois, dans des cages individuelles, dans des conditions contrôlées par l’air (20 ± 1 °C) et des cycles d’éclairage clair-obscur de 12 h/12 h. Offrez un régime alimentaire régulier et de l’eau du robinet tous les jours.
- Assurez-vous qu’au moment de l’opération, le lapin pèse plus de 3 kg.
- Anesthésier le lapin par injection intrapéritonéale de pentobarbital sodique (3 mg pour 100 g de poids corporel). Assurez-vous que les lapins sont complètement anesthésiés par l’incapacité à répondre à un pincement de patte. Fixer les lapins sur la table d’opération pendant la procédure d’opération.
REMARQUE : Assurez-vous que la durée de la procédure de modélisation est inférieure à 1 h.
- Rasez la région proximale du tibia à l’aide d’un rasoir électrique dans le sens inverse de la pousse des poils. Désinfectez la peau en appliquant une solution de povidone iodée.
- Marquez l’extrémité supérieure du tibia et la position du trou de forage pour l’injection avec S. aureus (la distance jusqu’à l’extrémité supérieure du tibia est de 1,5 cm) avec un stylo et une règle. Assurez-vous que les positions des trous de forage sont au milieu du plateau tibial horizontalement (Figure 1A).
- Coupez la peau du tibia à l’aide d’un scalpel n° 11 et faites une incision de 1 cm dans le périoste (Figure 1B, C). Percez un trou de 2 mm de diamètre dans le tibia à l’aide d’une perceuse à os électrique (figure 1D).
- Appuyez sur les trous de 2 mm de diamètre du plateau tibial avec un cylindre de cire d’os de 2 mm de diamètre et de 2 mm de hauteur (Figure 1E). Retirez la cire osseuse de rechange le long du plan horizontal du plateau tibial (Figure 1F). Vérifiez que le trou de 2 mm est rempli de cire d’os (Figure 1G).
note: Assurez-vous que les trous sont pleins de cire osseuse en vérifiant le trou avec ou sans débordement de sang.
- Cousez le périoste et la peau à l’aide d’une suture chirurgicale résorbable dans une suture verticale sur matelas pour empêcher l’animal de mâcher les sutures (figure 1H).
- Injecter 1 x 108 UFC/mL de solutions de S. aureus (30 μL par 100 g de poids corporel) à l’aide d’un injecteur d’asepsie de 1 mL (figure 1I). Assurez-vous que les aiguilles pénètrent dans la cire osseuse et injectez lentement la solution de S. aureus dans la moelle osseuse.
- Gardez l’animal dans des conditions chaudes et propres pour éviter les pertes de chaleur après le modélisme. Surveillez la fréquence respiratoire et la fréquence cardiaque. Après le réveil, logez les lapins dans des cages individuelles avec un accès libre à la nourriture et à l’eau.
