Administration de gènes basée sur un virus adénologique recombinant : une technique de livraison de transgènes et d’expression spécifique au cancer dans un modèle de rongeur

Résumé

Source : Ding, J. et al. Préparation de rAAV9 pour surexprimer ou inactiver des gènes dans le cœur de souris. J. Vis. Exp. (2016)

Dans cette vidéo, nous démontrons l’administration de gènes basés sur le virus associé à l’adéno-adéno-recombinant chez le petit de souris. Cette méthode aide à étudier l’expression des gènes dans les cellules ciblées.

Protocole

1. Traitez les souris néonatales avec rAAV9 à P0,5-P2,5 par injection sous-cutanée.

1. Préremplissez une seringue à insuline 29G1/2, 0,33 x 12,7 mm avec la solution de virus adéno-associé recombinant 9 (rAAV9). Attention à bien éliminer les bulles d’air.
2. Tenez le chiot cryo-anesthésié dans une main avec le pouce et l’index. Avant l’injection, passez la peau arrière du chiot avec un bâtonnet d’écouvillon saturé d’alcool isopropylique à 70 % pour maintenir l’état stérile. Insérez l’aiguille de la seringue dans l’endoderme antérieur-dorsal de l’animal à un angle de 5 à 10°. Injectez 50 à 70 μl de la solution rAAV9 à l’aide de la seringue à insuline.
   NOTE : rAAV9 peut également être administré à la souris par injection intrapéritonéale ou intraveineuse. L’expression efficace des gènes délivrés dans le cœur peut être obtenue. Cependant, l’injection intrapéritonéale peut parfois entraîner une expression perméable dans le foie. Après l’injection, l’état des petits a été surveillé tous les jours.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
vecteur rAAV9  ;	Noyau vectoriel de Penn  ;	P1967