Coloration à la safranine-O : une méthode pour visualiser l’intégrité structurelle et la cellularité du cartilage

Abstract

Source : Zhao, Y., et al. Établissement d’un modèle induit chirurgicalement chez la souris pour étudier le rôle protecteur de la progranuline dans l’arthrose. J. Vis. Exp. (2014).

Dans cette vidéo, nous montrons une procédure de coloration du cartilage à l’aide de safranine-orange. Cette méthode permet de visualiser le cartilage et de détecter tout dommage.

Protocol

1. Coloration à la safranine O

1. Commencez par les lames de verre contenant des sections sagittales en série couvrant une région allant du centre du condyle latéral au centre du condyle médial d’un modèle de souris euthanasiée avec le ménisque médial déstabilisé.
2. Ensuite, déparaffinisez les lames dans de l’oxylène et hydratez-les dans un gradient d’éthanol jusqu’à de l’eau distillée. Par la suite, les lames sont colorées à travers la solution d'hématoxyline de fer de Weigert, la solution verte rapide (FCF) à 0,05 %, la solution d'acide acétique à 1 % et la solution de safranine O à 0,1 %. Montez les lames à l’aide d’un support résineux.
3. Évaluez les lames marquées à la safranine O en fonction de la perte de protéoglycane (couleur rouge) dans le cartilage et du pourcentage de destruction dans la structure du cartilage, effectuez une analyse statistique pour le score histologique.