Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Coloration au violet cristallin : une technique pour visualiser des cellules cancéreuses résistantes aux médicaments à l’aide de tests de formation de colonies

12.4K vues

⸱

8 juillet 2025

Dans cet article

Résumé

Source : Mohr, L. et al., Génération de modèles de cellules cancéreuses de la prostate de résistance à l’agent anti-mitotique docétaxel. J. Vis. Exp. (2017)

Dans cette vidéo, nous démontrons un test de viabilité cellulaire à l’aide d’une procédure de coloration au violet cristallin pour les cellules cancéreuses chimiothérapeutiques résistantes aux médicaments.

Protocole

1. Caractérisation fonctionnelle de la résistance acquise au docétaxel par essai de formation de colonies

REMARQUE : Dans ce protocole, la chimiorésistance a été évaluée à l’aide de tests de formation de colonies. D'autres méthodes utilisées pour évaluer la viabilité cellulaire (c.-à-d. les tests MTS) peuvent être utilisées en fonction des préférences des chercheurs.

  1. Plaquez 2 000 cellules (DU145 ou 22Rv1, parentales et résistantes au docétaxel) par puits dans des plaques à 6 puits, en utilisant 2 mL de milieu par puits.
  2. Après 24 h, ajouter des concentrations croissantes de Do....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

figure-results-1
Figure 1 : Caractérisation fonctionnelle et phénotypique des modèles cellulaires résistants au docétaxel. Essais représentatifs de formation de colonies de cellules parentales et résistantes au docétaxel traitées avec les concentrations indiquées de docétaxel pendant 72 h. Le pourcentage de colonies pour chaque concentration de traitement est représenté dans le graphique ci-dessous. Les expériences sont triples et les données.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Cellules DU145 ATCC HTB-81
Cellules 22Rv1 ATCC CRL-2505
Docétaxel Produits chimiques Selleck S1148 en DMSO (10mM)
Plaques de culture tissulaire à 6 puits Faucon 353046
RPMI 1640 Moyen Gibco 11875093Complété par 10 % de FBS et 1 % de péniciline/streptomycine
Sérum fœtal bovin Foundation B Gémeaux 900208
1X solution saline tamponnée au phosphate (PBS) Corning Référence 21-040-CM
Cristal Violet Sigma-Aldrich C0775
Solution de formol à 10 % Sigma-Aldrich HT501128

Étiquettes

Essai de formation de coloniesEssai de viabilité cellulaireTraitement au docétaxelLavage au PBSSolubilisation à l'éthanolComptage manuel des coloniesFormation de colonies tumoralesRéponse à la concentration du médicament