Essai de criblage de nématicides à petites molécules : une méthode à débit moyen pour cribler des nématicides potentiels contre Ditylenchus dipsaci

Abstract

Source : Cammalleri, S. R., et al. Élevage et dépistage du nématode parasite des plantes Ditylenchus dipsaci. J. Vis. Exp. (2022).

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test de dépistage pour identifier l’efficacité des nématicides à petites molécules contre les nématodes. Les nématicides sont considérés comme efficaces s’ils entraînent une diminution du nombre de nématodes mobiles dans l’échantillon après l’exposition.

Protocol

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE

1. Criblage in vitro de petites molécules

1. Préparez les plaques de dosage en suivant les étapes ci-dessous.
   1. Versez de l’eau distillée autoclavée dans une auge stérile et, à l’aide d’une pipette multicanaux, versez 40 μL d’eau distillée de l’auge dans chaque puits d’une plaque à fond plat de 96 puits.
2. Préparez l’outil d’épinglage et ajoutez les produits chimiques.
   1. Installez des plateaux à b....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bécher de 50mL	Pyrex	CLS100050
Plaque à 96 puits	Sarstedt	Référence 83.3924
Aluminium	Alcan Plus
Dissection de la portée	Leica	Leica MZ75
Dmso	Sigma-Aldrich	472301-500ML
toboggan en verre	Magna	60 à 1200
Papier buvard non pelucheux	V&P Scientifique	VP 522-100
Pointes de pipette à faible rétention (200 uL)	LABFORCE	Référence 1159M44
Pipette multicanaux	Eppendorf research plus	3125000036
NaOH	Sigma-Aldrich	S8045-500G
Parafilm	Bemis	Réf. PM-996
Solutions de nettoyage des broches	V&P Scientifique	VP110A
Pinner	V&P Scientifique	VP381N
Bacs de rinçage Pinner	V&P Scientifique	VP 421
Réservoir de réactifs avec couvercle pour pipettes multicanaux	Sigma-Aldrich	BR703459
incubateur à secousses	Scientifique du Nouveau-Brunswick	I26