Techniques de dosage

Dans cette vidéo, nous montrons un test permettant d’établir la présence de phospholipase dans l’extrait de venin brut d’Anthopleura dowii, une anémone de mer marine. Le test utilise une technique de diffusion sur gel d’agarose, dans laquelle l’enzyme phospholipase diffuse et décompose les phospholipides incorporés dans le milieu solide de manière radiale.

Dans cette vidéo, nous décrivons un test de chiralité cellulaire pour déterminer le biais d’alignement des cellules dans une limite géométrique confinée telle qu’un micromotif en anneau. La chiralité est une propriété inhérente à la plupart des types de cellules et est déterminée par des facteurs génétiques et environnementaux. Connaître la chiralité d’une population cellulaire normale peut aider à dépister les cellules traitées par médicament.

Cette vidéo décrit un test colorimétrique pour mesurer l’activité de la citrate synthase mitochondriale présente dans l’homogénat tissulaire de la drosophile.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode colorimétrique pour déterminer la teneur en fer non héminique dans le tissu hépatique de souris. Le sulfonate de bathophénanthroline est utilisé comme substrat chromogène en présence d’un agent réducteur, qui convertit le fer ferrique en fer ferreux chélatable.

Cette vidéo présente une technique de quantification duCO2 libéré lors de l’oxydation du substrat à l’aide de 14substrats radiomarqués au carbone. Les 14CO2 libérés sont piégés dans une solution alcaline et quantifiés par un compteur à scintillation. L’oxydation des différents substrats varie entre les tissus et reflète l’état physiopathologique du tissu.

Dans cette vidéo, nous montrons une procédure permettant d’étudier l’organisation de la septine sur une bicouche lipidique supportée de verre in vitro à l’aide de la microscopie à fluorescence à réflexion interne totale.

Cette vidéo décrit la technique d’étude de l’assemblage de la protéine septine sur des microsphères recouvertes de bicouches lipidiques. Cette technique aide à comprendre les assemblages de protéines dépendants de la courbure sur des surfaces courbes.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test de dépistage pour identifier l’efficacité des nématicides à petites molécules contre les nématodes. Les nématicides sont considérés comme efficaces s’ils entraînent une diminution du nombre de nématodes mobiles dans l’échantillon après l’exposition.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode de détection des dépôts de calcium sécrétés par les ostéoblastes à l’aide d’un colorant anionique, le rouge d’alizarine S. Les ostéoblastes cultivés sont d’abord colorés, puis le colorant est récupéré pour la quantification colorimétrique des dépôts de calcium ou du degré de minéralisation des ostéoblastes.

Dans cette vidéo, nous décrivons le test de contact larvaire pour évaluer la toxicité de l’antagoniste des récepteurs de la dopamine, l’amitriptyline, sur les larves du troisième stade larvaire des moustiques, vecteurs connus de plusieurs maladies infectieuses humaines. L’évaluation de la mortalité larvaire lors de l’incubation avec différentes concentrations d’amitriptyline sur différents intervalles de temps permet de déterminer sa concentration létale 50.

Dans cette vidéo, nous démontrons le test topique pour déterminer la toxicité d’un insecticide potentiel sur les moustiques femelles adultes. À l’aide d’un antagoniste des récepteurs de la dopamine qui provoque une inhibition létale de la neurotransmission chez les moustiques, cette méthode décrit une façon d’évaluer les effets toxiques des insecticides lors de l’application topique.

Cette vidéo montre un test d’alimentation sanguine permettant d’évaluer la mortalité et la fécondité de composés d’essai ayant de nouveaux modes d’action sur des moustiques femelles. Cette technique permet de sélectionner de nouvelles classes d’insecticides pour tuer la population résistante de moustiques et contrôler la propagation des maladies.

Dans cette vidéo, nous démontrons un test d’agrégation de protéines basé sur des cellules utilisant des inhibiteurs de protéasome, qui bloquent l’activité du protéasome, empêchant les protéines mutantes mal repliées, fusionnées à un marqueur fluorescent, de subir une dégradation protéasomale dépendante de l’ubiquitine, conduisant à leur accumulation dans le cytoplasme cellulaire. Les agrégats de protéines sont ensuite visualisés et quantifiés par microscopie à fluorescence.

Cette vidéo présente un essai biologique rapide permettant d’étudier l’activité des endotoxines dans un échantillon de sang entier au moyen d’une méthode basée sur la chimiluminescence. Ce test est un test de biomarqueur rapide et sensible pour le diagnostic précoce du sepsis médié par les endotoxines.

Cette vidéo décrit le format turbidimétrique du test de lysat d’amibocytes de Limulus, ou LAL, pour estimer la contamination par les endotoxines dans les nano-formulations de doxorubicine liposomale pégylée. La turbidité de la solution suite à la réaction de l’endotoxine avec le réactif LAL permet d’estimer l’endotoxine dans l’échantillon.

Cette vidéo décrit un test de caillot de gel pour déterminer la présence d’endotoxines bactériennes dans des nano-formulations à l’aide de lysat d’amibocytes Limulus dérivé des cellules sanguines de limules. Le test permet de tester la contamination par les endotoxines des produits pharmaceutiques, y compris les formulations nano-dérivées.

Dans cette vidéo, nous démontrons un test à haut débit pour le criblage d’enzymes actives en glucides à l’aide de substrats d’hydrogel polymères chromogènes insolubles. L’enzyme dégrade ces substrats en un produit coloré soluble qui peut être quantifié en mesurant l’intensité de la couleur du produit.

Cette vidéo présente un test de criblage d’enzymes efficaces pour dégrader des polysaccharides complexes dans la biomasse végétale à l’aide de biomasse chromogène insoluble ou ICB. Les enzymes hydrolysent l’ICB pour libérer des oligosaccharides solubles liés à des colorants, et l’activité enzymatique est évaluée par analyse colorimétrique du produit de réaction.

Cette vidéo présente une méthode de coloration nucléaire pour détecter l’effet cytotoxique du mitocan sur les cellules cancéreuses sensibles aux médicaments et les variantes saines. La double coloration avec des colorants liant l’ADN tels que l’iodure de propidium et le colorant Hoechst permet de distinguer clairement les cellules mortes des cellules vivantes, aidant ainsi à évaluer la cytotoxicité du médicament.

Dans cette vidéo, nous effectuons un test de motilité in vitro pour analyser les interactions actine-myosine. Le mouvement de glissement des filaments d’actine sur des molécules de myosine immobilisées est visualisé à l’aide de la microscopie à fluorescence.

Dans cette vidéo, nous effectuons un test de motilité in vitro pour analyser les interactions actine-myosine. Le mouvement de glissement des filaments d’actine sur des molécules de myosine immobilisées est visualisé à l’aide de la microscopie à fluorescence.

Cette vidéo démontre l’action capillaire radiale différentielle du dosage des ligands, une technique de criblage systématique à haut débit des protéines de liaison du second messager du nucléotide intracellulaire. Cette technique permet de lier directement les messagers à la protéine cible surexprimée dans le lysat cellulaire, sans avoir à se purifier des protéines.

Cette vidéo décrit un test de dégradation des protéines mal repliées à l’aide d’un traitement au cycloheximide et d’un fractionnement au détergent. Cette méthode permet d’étudier la dynamique des protéines mal repliées et de découvrir les mécanismes approfondis du renouvellement des protéines.

Cette vidéo décrit un test sur microplaque basé sur la fluorescence in vitro pour étudier la cinétique de dégradation d’une protéine mutante luciférase mal repliée marquée par fluorescence et exprimée dans les noyaux de cellules de mammifères transfectées. Le test implique le traitement de cellules exprimant la protéine mutante fluorescente avec un inhibiteur de traduction et un inhibiteur de protéasome afin d’évaluer la dégradation médiée par le protéasome de la protéine mal repliée.

La vidéo montre le dosage de la luciférase utilisé pour quantifier les protéines marquées à la luciférase. Le test utilise une enzyme luciférase modifiée composée d’un gros fragment qui se lie au petit fragment, qui est conjugué à une protéine d’intérêt. Les sous-unités liées forment une enzyme active qui, en présence du substrat, libère un signal luminescent. Ce signal est ensuite quantifié à l’aide d’un luminomètre.

Cette vidéo présente un test basé sur l’imagerie in vivo pour déterminer le déclin de la protéostasie dû au vieillissement. Le test utilise Caenorhabditis elegans exprimant la protéine de fusion YFP de la polyglutamine dans les muscles de la paroi corporelle pour mesurer l’agrégation de la polyglutamine associée à l’âge et l’induction de la protéotoxicité, conduisant à la paralysie.

Dans cette vidéo, nous démontrons le test homogène de proximité luminescent amplifié, un test de proximité basé sur des billes. Il utilise des billes accepteuses et donneuses de taille homogène, immobilisées avec deux protéines qui ont tendance à interagir pour cribler les petites molécules potentielles inhibant les interactions protéiques.

Cette vidéo présente un test pour surveiller l’acidification intestinale chez les mouches drosophiles. Après l’ingestion d’aliments complétés par un colorant indicateur de pH, l’acidification de la lumière intestinale entraîne un changement de couleur du colorant. L’inspection visuelle du tube digestif des mouches pour examiner le changement de couleur fournit des preuves d’acidification.

Cette vidéo décrit un test basé sur un lecteur de plaque pour mesurer l’absorption de calcium mitochondrial dans des mitochondries isolées. Le test analyse le signal de fluorescence d’un colorant fluorescent sensible au calcium pour étudier la cinétique de l’absorption mitochondriale du calcium et de la surcharge calcique.

Cette vidéo décrit une méthode colorimétrique pour quantifier la teneur en protéines solubles dans les tissus végétaux. La méthode utilise le colorant Coomassie Brilliant Blue G-250, qui interagit avec la protéine soluble pour former un complexe protéine-colorant stable de couleur bleue, proportionnel à la teneur en protéines solubles dans le tissu.

Cette vidéo décrit la méthode de quantification des glucides digestibles présents dans les tissus végétaux. Cela permet de collecter des données sur divers tissus végétaux pour étudier l’écologie nutritionnelle, les interactions plantes-herbivores et la dynamique du réseau trophique.

Dans cette vidéo, nous démontrons le dosage de la luciférase pour quantifier la croissance de l’agent pathogène intracellulaire Toxoplasma gondii. En utilisant une souche de Toxoplasma qui exprime l’enzyme luciférase après avoir infecté les cellules hôtes, l’activité de la luciférase est détectée dans la culture cellulaire infectée pour déterminer la reproduction réussie du parasite.

La vidéo montre le dosage de la luciférase utilisé pour déterminer l’efficacité d’un inhibiteur chimique antiparasitaire contre l’agent pathogène intracellulaire Toxoplasma gondii. L’étude implique que des parasites exprimant la luciférase envahissent les cellules hôtes pour se répliquer et survivre. L’inhibiteur chimique se lie aux protéases cystéine du parasite et inhibe la réplication. L'activité de la luciférase détectée est proportionnelle aux changements de pli dans la croissance du...

Cette vidéo présente un protocole in vitro pour étudier l’élimination médiée par Msp1 de protéines TA mal localisées intégrées dans la bicouche lipidique des liposomes. Les protéines Msp1 et TA sont co-reconstituées en liposomes, et la translocation dépendante de l’ATP des protéines TA est confirmée par purification par affinité.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode simple et robuste pour déterminer le potentiel cytotoxique d’un médicament trypanocide contre un parasite, Trypanosoma cruzi, exprimant l’enzyme β-galactosidase. La β-galactosidase sert d’indicateur de lyse cellulaire, et son activité peut être utilisée pour évaluer les effets du médicament.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test qui étudie les mécanismes de libération de monoamines à partir des neurones de tranches de cerveau de rat ex vivo métaboliquement actives, lorsqu’elles sont traitées avec des médicaments testés. Le test démontre que les médicaments neurostimulants induisent la libération de monoamine via les transporteurs cellulaires de monoamine, tandis qu’une concentration élevée de KCl induit une libération vésiculaire de monoamine médiée par...

Cette vidéo décrit une méthode in vivo pour dépister le potentiel protecteur des composés neuroprotecteurs des essais dans la réduction de l’agrégation polyQ dans les cellules musculaires de la paroi corporelle des nématodes et l’amélioration de la protéotoxicité associée à l’agrégation.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode pour évaluer l’effet neuroprotecteur d’un composé testé, l’astragalane, sur la survie neuronale chez Caenorhabditis elegans à partir de la neurotoxicité médiée par polyQ. Le test utilise Caenorhabditis elegans exprimant les répétitions polyQ anormalement expansées fusionnées à la GFP dans leurs neurones ASH pour mesurer la survie neuronale après le traitement par composé testé.

Cette vidéo décrit un test d’évitement osmotique pour examiner le comportement de chimioévitement dans un modèle de ver transgénique. Le comportement d’évitement est testé dans une plaque en présence d’une barrière osmotique élevée et d’un chimioattractant. Les vers avec une perte fonctionnelle de neurones sont attirés par le chimioattractant, traversent la barrière osmotique élevée et deviennent paralysés dans la zone de piégeage à cause de la solution anesthésique.

Cette vidéo décrit un test colorimétrique pour la mesure du lactate dans les lysats cellulaires à l’aide de l’enzyme lactate déshydrogénase. Cette enzyme convertit le lactate en pyruvate, ainsi que la conversion du NAD en NADH qui réagit avec les colorants au tétrazolium et donne un produit coloré qui peut être mesuré spectrophotométriquement pour quantifier le lactate.

Cette vidéo décrit un test colorimétrique pour mesurer quantitativement le pyruvate dans les fractions cellulaires de Caenorhabditis elegans. En utilisant le peroxyde d’hydrogène produit à partir de la réaction enzymatique de la pyruvate oxydase avec le pyruvate cellulaire, un colorant chromogène est oxydé pour produire un produit coloré, mesuré à l’aide de la colorimétrie pour déterminer la concentration de pyruvate.

Cette vidéo décrit un test spectrophotométrique pour l’estimation de l’activité de la glycogène synthase. La méthode repose sur la réduction de l’absorbance du NADH avec le temps et indique l’activité de la glycogène synthase.

Dans cette vidéo, nous décrivons un test spectrophotométrique qualitatif pour déterminer l’étendue de la ramification dans un échantillon de glycogène avec une structure non caractérisée. La comparaison des maxima d’absorbance de l’échantillon non caractérisé avec celle des polysaccharides avec des structures ramifiées connues indique la présence de ramifications dans l’échantillon non caractérisé.

Cette vidéo présente le dosage des substances réactives de l’acide thiobarbiturique (TBARS) pour évaluer le stress oxydatif dans des échantillons biologiques.

Cette vidéo montre le test de complémentation de la luciférase fractionnée pour détecter les interactions protéine-protéine. Dans cet essai, les protéines d’intérêt sont associées à de petits et de grands fragments de l’enzyme luciférase. Lorsque les protéines interagissent, les grands et les petits fragments se combinent pour former un complexe enzymatique actif, qui, en présence d’un substrat spécifique, libère une luminescence brillante qui peut être mesurée.

Cette vidéo montre la technique de prélèvement d’un échantillon de sol pour l’analyse des propriétés hydrauliques. La zone d’échantillonnage est dégagée et la croûte supérieure est évacuée. L’anneau d’échantillonnage est ensuite placé dans le sol pour recueillir l’échantillon. L’anneau contenant l’échantillon est ensuite nettoyé, étiqueté, emballé et transféré sans être dérangé pour analyse.

Source:Léa Rubira1, Hélène Sturer1, Louise Combette1, Sandra Santini1, Stéphane Renaud1, Cyril Fersing1,21Service de médecine nucléaire, Institut régional du Cancer de Montpellier (ICM), Univ Montpellier, 2IBMM, Univ Montpellier, CNRS, ENSCMCette vidéo montre l’infusion sûre et contrôlée d’un produit radiopharmaceutique à l’aide d’une pompe péristaltique dotée d’un système de cassette à deux lignes. La configuration comprend la connexion des conduites de solution saline et de perfusion, le...

Source:Anthony J. Yosick1,2, Christine Massie1, Emma Knapp2, Hani A. Awad1,2,31Department of Biomedical Engineering, University of Rochester, US2Center for Musculoskeletal Research, Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USA3Department of Orthopedics, University of Rochester Medical Center, USAThe video demonstrates fall-related wrist fractures using human cadaver forearms with varying bone densities. Specimens are standardized by removing upper soft tissue,...

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test permettant de visualiser et de quantifier l’absorption cellulaire de vésicules extracellulaires ou VE. Ce test utilise l’imagerie fluorescente 3D à l’aide d’un microscope confocal et permet de distinguer les VE internalisés de ceux collés à la surface de la cellule.

Cette vidéo décrit un test d’invasion utilisant un réseau à trois chambres basé sur l’impédance électrique. Cette technique mesure le potentiel invasif des cellules cancéreuses sous l’influence de facteurs solubles sécrétés par les cellules stromales résidentes dans les microenvironnements tumoraux.

Dans cette vidéo, nous démontrons un test de protection enzymatique in vitro à base de lysostaphine pour quantifier l’internalisation de Staphylococcus aureus dans les cellules A549. Le test aide aux études qualitatives, quantitatives et de caractérisation de la charge bactérienne intracellulaire dans les cellules hôtes.

Dans cette vidéo, nous décrivons un test de résorption ostéoclastique in vitro sur des plaques de culture cellulaire enrobées de phosphate de calcium cultivées avec des ostéoclastes dérivés de cellules mononucléées du sang périphérique humain. Les ostéoclastes forment un anneau d’actine caractéristique sur la matrice recouverte de phosphate de calcium de la plaque de culture cellulaire et dégradent la matrice dans la région du cycle d’actine pour libérer des ions calcium et phosphate, ce qui...

Dans cette vidéo, nous décrivons un test de séparation de phase, dans lequel des protéines intracellulaires comprenant des régions intrinsèquement désordonnées fusionnées à un domaine d’oligomérisation photosensible sont induites par l’exposition à la lumière bleue à s’auto-associer en condensats liquides sans membrane.

Cette vidéo fait la démonstration d’un test modifié basé sur des billes de microsupport incorporant des péricytes pour étudier la germination endothéliale au cours des premiers stades de l’angiogenèse. Le test fournit un modèle expérimental in vitro pour comprendre les mécanismes moléculaires de l’angiogenèse et l’effet des thérapies anti-angiogénétiques.

Cette vidéo décrit un test in vitro visant à déterminer l’hémolyse induite par l’ionophore de calcium ou la lyse des globules rouges dans un échantillon humain. Le dosage mesure le pourcentage d’hémolyse en quantifiant l’hémoglobine libérée par les érythrocytes rompus.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration du test de liaison à l’Annexine V pour mesurer le degré d’éryptose, la mort cellulaire programmée par l’érythrocyte, à l’aide de la coloration fluorescente à l’Annexine V. Les érythrocytes apoptotiques présentent une translocation de la phosphatidylsérine de la feuille interne à la foliole externe de la membrane cellulaire, provoquant la liaison de l’annexine V marquée au fluorophore à la phosphatidylsérine transloquée, émettant ainsi un signal...

Cette vidéo présente une technique in vitro pour évaluer la biodisponibilité du fer dans des sources alimentaires complexes. La technique combine la simulation de la digestion humaine avec l’absorption du fer par des cellules Caco-2 différenciées. La formation de ferritine intracellulaire agit comme un marqueur de l’absorption cellulaire du fer.

Cette vidéo présente un test in vitro permettant de mesurer indirectement l’absorption intracellulaire du glucose. Le test utilise un analogue du glucose marqué par fluorescence pour établir une corrélation entre l’épuisement extracellulaire du glucose et l’absorption intracellulaire du glucose.

Dans cette vidéo, nous démontrons une technique ex vivo pour mesurer l’épuisement extracellulaire des analogues du glucose dans les organes de souris prélevés. Il s’agit d’incuber le tissu de la souris dans une solution contenant du désoxyglucose marqué par fluorescence, qui est absorbé par les cellules. L’absorption des analogues du glucose peut être déterminée indirectement en mesurant la fluorescence du milieu incubé.

Cette vidéo décrit la mesure de la contraction des cellules musculaires lisses aortiques (SMC) à l’aide de la détection d’impédance électrocellulaire-substrat, ou ECIS. ECIS mesure la locomotion des cellules et constitue une méthode fiable pour mesurer les contractions.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode in vitro pour évaluer le potentiel allergique d’un antigène à induire la dégranulation du basophile. La β-hexosaminidase est utilisée comme indice de libération de médiateurs chimiques, et l’activité enzymatique de la β-hexosaminidase est mesurée à l’aide d’un substrat fluorogène.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test rapide par addition unique pour évaluer la viabilité cellulaire dans des organoïdes dérivés de patients lors d’un traitement avec un agent de test utilisant les niveaux d’ATP intracellulaires comme marqueur de l’activité métabolique cellulaire. Les niveaux intracellulaires d'ATP sont mesurés à l'aide de la réaction luciférase/luciférine, où l'intensité lumineuse émise indique la viabilité cellulaire et, à son tour, le pouvoir inhibiteur...

Cette vidéo décrit la technique de visualisation du stress oxydatif dans les organoïdes en culture. Ce travail aide à comprendre le niveau de stress oxydatif dû à l’accumulation de ROS dans les différents types de cellules présentes dans un organoïde après un traitement avec différents modulateurs de ROS.

Cette vidéo présente un test de cytométrie en flux permettant de quantifier les niveaux de ROS dans des organoïdes intestinaux 3D obtenus à partir de souris transgéniques exprimant la GFP. Cette méthode fournit un modèle expérimental in vitro pour étudier l’efficacité des composés testés sur la production de ROS.

Dans cette vidéo, nous montrons une méthode pour évaluer l’effet des osmolytes sur la formation de persistants bactériens. Les cellules bactériennes sont d’abord exposées à des osmolytes pour induire un stress osmotique, déclenchant la formation de persistants, puis traitées avec des antibiotiques pour énumérer les persistants.

Cette vidéo présente une méthode basée sur la microscopie à fluorescence pour étudier la compétition bactérienne au niveau de la cellule unique. Cette méthode permet de mieux comprendre la structure et la fonction des communautés bactériennes.

Cette vidéo décrit le dosage de la plaque virale du virus infectieux de l’herpès simplex ou HSV. Les particules virales diluées sont inoculées à la monocouche de cellules épithéliales. Lors de l’incubation, le virus forme des plaques et est compté visuellement pour déterminer le titre du virus infectieux.

Dans cette vidéo, le test TUNEL est effectué pour détecter la présence de cellules apoptotiques dans un échantillon. L'étude consiste à utiliser une ADN polymérase spéciale - la désoxynucléotidyl transférase terminale - qui catalyse l'ajout de dUTP marqués à l'extrémité 3' de l'ADN fragmenté, qui peut être observé et identifié au microscope à fluorescence.

Cette vidéo décrit un test luminescent in vitro de caspase-3/7 pour quantifier la mort cellulaire ou l’apoptose. Le dosage mesure la luminescence produite suite au clivage de la caspase-3/7 d’un substrat DEVD proluminescent. La luminescence générée est proportionnelle à l’activité de la caspase-3/7.

Cette vidéo démontre une technique d’immunomarquage pour visualiser l’engloutissement des cellules apoptotiques dans les cellules embryonnaires homogénéisées de Drosophila melanogaster. Cette méthode fournit des informations sur la physiologie cellulaire en déterminant l’étendue de l’engloutissement cellulaire apoptotique.

Dans cette vidéo, nous démontrons le test d’efférocytose pour étudier la clairance des cellules apoptotiques à l’aide de la microscopie confocale. L’efférocytose est un processus en plusieurs étapes où les cellules apoptotiques sont englouties par des phagocytes et dégradées dans des vésicules appelées efférosomes. Ce protocole fournit une méthode pour visualiser les parties internalisées et non internalisées des cellules apoptotiques individuelles et quantifier l’efférocytose.

Dans cette vidéo, nous démontrons qu’en présence d’un inhibiteur de phosphodiester, le cycle cellulaire de l’ovocyte est arrêté au niveau de la prophase-I, au cours de laquelle les ARNm transcrits sont stockés en l’absence de traduction. Après la libération de l’inhibiteur, la maturation des ovocytes reprend et les cellules entrent en métaphase. Le signal de l’ARNm rapporteur fusionné avec le gène cible en métaphase-I indique l’activation de la machinerie translationnelle et de l’expression des...

Cette vidéo décrit un test fluorométrique in vitro visant à évaluer les effets des formulations de larmes artificielles sur l’activité métabolique cellulaire des cellules épithéliales cornéennes à l’aide d’une solution de bleu Alamar à base de résazurine. Une formulation non toxique maintient les cellules dans un état sain et métaboliquement actif, facilitant la réduction de la résazurine en une résorufine hautement fluorescente.

Cette vidéo décrit un test basé sur l’imagerie par microscopie confocale pour mesurer l’absorption de calcium mitochondrial dans les cellules en culture. Le test utilise le colorant fluorescent sensible au calcium Rhod-2/AM pour mesurer le calcium mitochondrial dans les cellules cultivées perméabilisées.

Cette vidéo traite du test de fuite de fluorescence pour étudier les interactions des peptides pénétrant dans les cellules avec les membranes cellulaires à l’aide d’imitations de membranes cellulaires - de grandes vésicules unilamellaires, ou LUV, encapsulées avec un colorant fluorescent et un extincteur.

Cette vidéo présente une technique de dosage permettant d’évaluer la calcification des cellules interstitielles de la valve aortique in vitro. Le test permet de quantifier la concentration de calcium à l’aide du réactif arsenazo III, un colorant sensible au calcium qui réagit avec les ions calcium pour former un complexe calcium-arsenazo de couleur violette.

Cette vidéo décrit la technique d’enregistrement de l’activité épileptiforme de coupes organotypiques du cortex rhinal et de l’hippocampe ex vivo à l’aide de l’électrophysiologie ou de l’EEG. Cela permet d’étudier la dynamique et la progression de l’épileptogénèse et de dépister des cibles thérapeutiques potentielles pour traiter l’épilepsie.

Cette vidéo décrit un test de cicatrisation des plaies en co-culture sans contact pour évaluer la capacité migratoire des myoblastes murins. Cela aide à comprendre les composantes d’envoi et de réception du signal des interactions de signalisation Wnt paracrine non canoniques in vitro.

La vidéo montre le test de comète pour détecter les dommages à l’ADN après une exposition à des agents nocifs. Dans des conditions alcalines, l’ADN se déroule et se dénature, et lors de l’électrophorèse, l’ADN intact et endommagé migre différemment dans le gel d’agarose, formant une structure en forme de comète. L’ADN non endommagé qui migre lentement forme la tête de comète circulaire, tandis que les fragments d’ADN endommagés qui migrent rapidement forment la queue de comète allongée.

Cette vidéo présente une technique in vitro pour estimer l’absorption d’acides aminés par les cellules stromales dérivées de la moelle osseuse. Les transporteurs d’acides aminés dépendants du Na+ médient l’absorption des acides aminés radiomarqués à l’intérieur des cellules, et l’absorption cellulaire est estimée en mesurant la radioactivité.

Dans cette vidéo, nous démontrons le processus de surveillance en temps réel des événements cellulaires, y compris la prolifération des cellules adhérentes, via un test d’impédance cellulaire. Ici, les cellules adhérentes agissent comme des isolants, limitant le flux de courant entre les électrodes et augmentant l’impédance.

Dans cette vidéo, nous abordons la corrélation entre le CIT50 et la multiplicité des infections virales. Les cellules infectées par le virus présentent des effets cytopathiques, provoquant leur mort et leur détachement de la microélectrode d’or, ce qui réduit l’impédance.

Cette vidéo décrit une technique basée sur l’impédance cellulaire pour étudier la cinétique de survie des virus qui induisent des effets cytopathiques. La méthode mesure l’impédance électrique des cellules adhérentes infectées par le virus prétraitées avec une solution saline.

Cette vidéo démontre le développement d’un modèle ex vivo de germination choroïdienne pour étudier l’angiogenèse microvasculaire oculaire. L’essai consiste à cultiver des explants d’yeux de souris contenant le tissu choroïde attaché à la sclérotique et à l’épithélium pigmentaire rétinien dans des conditions spécifiques qui favorisent la germination microvasculaire choroïdienne.

Cette vidéo décrit un test de rapporteur cellulaire pour déterminer l’activité œstrogénique de composés d’origine végétale. Un composé ayant une activité semblable à celle des œstrogènes imite sa liaison aux récepteurs d’œstrogènes et entraîne la transcription en aval des gènes de l’enzyme rapporteure. L’enzyme rapporteure génère une bioluminescence dans une réaction, indiquant l’activité œstrogénique du composé.

Cette vidéo décrit le test de transfert d’énergie par résonance de Förster ou TR-FRET résolu en temps pour déterminer la phosphorylation d’une protéine endogène à l’aide de fluorophores donneurs et accepteurs marqués sur des anticorps spécifiques à une protéine testée. Cette technique est conçue pour mesurer la phosphorylation des protéines testées dans les lysats cellulaires.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode basée sur la luminescence pour évaluer la neurotoxicité des composés à petites molécules favorisant la croissance des neurites sur la viabilité des neurones dérivés de hNPC. Le test mesure le niveau d’ATP intracellulaire, un indicateur de la viabilité cellulaire, afin d’évaluer la neurotoxicité après le traitement du composé testé.

Cette vidéo présente la technique de multi-spectrométrie échographique par radiofréquence (REMS) pour évaluer la densité minérale osseuse (DMO). Le patient est positionné en décubitus dorsal et un gel à ultrasons est appliqué sur le col du fémur, un site sujet aux fractures dans le fémur. La sonde émet ensuite des ondes ultrasonores, qui se réfléchissent sur le tissu osseux à une vitesse influencée par la DMO. La sonde capte ces ondes réfléchies, ce qui permet de quantifier la DMO.

Cette vidéo démontre l’aspiration percutanée de spermatozoïdes épididymaux d’un patient atteint d’azoospermie, une affection caractérisée par l’absence de spermatozoïdes dans le sperme. La procédure consiste à désinfecter la région du scrotum, à aspirer le liquide épididymaire à l’aide d’une seringue avec une solution de culture spécialisée et à traiter l’échantillon collecté pour isoler les spermatozoïdes viables. Les spermatozoïdes préparés sont ensuite prêts à être utilisés dans des...

Source:Elettra Leo1, Luiza H.D. Cardoso1, Sabine Schmitt1, Erich Gnaiger11Oroboros InstrumentsCette vidéo explique comment le flux d’oxygène est utilisé pour évaluer la respiration mitochondriale dans les cellules de mammifères vivantes et perméabilisées. Il démontre l’utilisation séquentielle de la digitonine, des substrats métaboliques, de l’ADP, d’un découpleur et d’un inhibiteur pour caractériser différents états respiratoires. Le profil de flux d’oxygène qui en résulte révèle la fonction...

Cette vidéo décrit une technique d’immunodosage utilisant des billes magnétiques fluorescentes ou des microsphères couplées à différents antigènes pour détecter simultanément divers isotypes d’anticorps dans un échantillon de sérum. Le test est utile pour comprendre la séroconversion pendant une infection ou après la vaccination.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test d’immunoprécipitation, appelé test de capture VLP, pour isoler des particules pseudo-virales présentant un antigène, ou VLP, à partir d’un échantillon. L’antigène se lie à des anticorps spécifiques liés à des billes magnétiques, formant un complexe antigène-anticorps immobilisé qui est ensuite séparé et stocké pour une analyse plus approfondie.

Cette vidéo présente une technique de quantification sensible de la phosphorylation des protéines à l’aide d’un test pull-down à molécule unique. La fonctionnalisation de la polyéthylène glycol-biotine et l’utilisation d’anticorps marqués augmentent la détection de la tyrosine phosphorylée avec spécificité.

Cette vidéo montre la méthode in vitro de SUMOylation des protéines de substrat à l’aide d’une cascade enzymatique séquentielle. De plus, l’état SUMOylé de la protéine est identifié à l’aide de la technique d’électrophorèse et d’immunobuvardage.

Dans cette vidéo, nous montrons le test basé sur le système biorapporteur HiBit-RBD pour détecter les anticorps neutralisants du SARS-CoV-2. Ce système cible le domaine RBD viral en utilisant un système rapporteur bioluminescent contenant HiBiT fusionné au domaine RBD.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test colorimétrique in vitro pour détecter la présence d’anticorps neutralisants contre les vecteurs du virus adéno-associé recombinant de sérotype 6 exprimant la phosphatase alcaline (rAAV6) dans des échantillons de sérum de mouton. Le test utilise la réaction entre l’AAV codant pour un gène de phosphatase alcaline placentaire humaine et son substrat pour générer un produit violet insoluble.

Cette vidéo présente un test basé sur l’immunofluorescence très sensible pour détecter les dommages oxydatifs induits par les PM2,5 dans le cœur des embryons de poisson-zèbre en mesurant les niveaux de 8-OHdG et de γH2AX, qui indiquent respectivement des dommages à l’ADN et des cassures de l’ADN double brin.

Cette vidéo démontre la technique d’évaluation de la mort neuronale dans des coupes organotypiques du cortex rhinal-hippocampe. La mort neuronale se produit par le biais de crises d’épilepsie évolutives – ressemblant à l’épilepsie in vivo – et est détectée par double coloration des cellules mortes à l’aide d’iodure de propidium et d’immunofluorescence.

Cette vidéo montre la détection de complexes anticorps-antigène chimiquement conjugués via la technique ELISA (Sandwich Enzyme-Linked Immunosorbent assay). L’anticorps capturé se lie à l’épitope spécifique de l’antigène du conjugué anticorps-antigène, qui peut être visualisé plus tard à l’aide d’un anticorps secondaire lié à une enzyme.

Dans cette vidéo, nous démontrons un test d’immunofluorescence basé sur EGFP pour identifier l’efficacité des protéines cibles sur la croissance neuritaire des neurones corticaux primaires. Les neurones primaires sont transfectés avec une protéine fluorescente, EGFP, et une protéine cible, puis un immunodosage est effectué pour étudier l’effet de la protéine cible sur la croissance des neurites.

Dans cette vidéo, nous démontrons le dosage immunologique par électrochimiluminescence pour la quantification des niveaux de protéines cibles dans différents échantillons. Ce dosage est basé sur la luminescence produite dans la réaction électrochimique. L’intensité de la lumière émise est proportionnelle à la quantité de protéine cible dans l’échantillon.

La vidéo décrit la préparation d’un échantillon de tissu pour l’imagerie par cytométrie de masse. Le tissu est d’abord traité pour démasquer les épitopes de l’antigène, perméabiliser les cellules et bloquer les sites de liaison des anticorps non spécifiques. Ensuite, le tissu est incubé avec un cocktail d’anticorps conjugués à des métaux et une coloration nucléaire. Enfin, l’échantillon de tissu traité est imagé à l’aide d’un scanner optique.

Cette vidéo montre la préparation d’un plasma riche en plaquettes (PRP) de haute qualité par le dépistage de la numération plaquettaire, la collecte et la centrifugation du sang et l’isolement des plaquettes. Ce PRP est utilisé dans des applications thérapeutiques pour la régénération et la cicatrisation des tissus.