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Test d’immunofluorescence pour évaluer l’effet des protéines cibles sur la croissance des neurites

8 juillet 2025

Dans cet article

Résumé

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Source : Chan, W., W., R. et al. An Enhanced Green Fluorescence Protein-based Assay for Study Neurite Outgrowth in Primary Neurons. J. Vis. Exp. (2019).

Dans cette vidéo, nous démontrons un test d’immunofluorescence basé sur EGFP pour identifier l’efficacité des protéines cibles sur la croissance neuritaire des neurones corticaux primaires. Les neurones primaires sont transfectés avec une protéine fluorescente, EGFP, et une protéine cible, puis un immunodosage est effectué pour étudier l’effet de la protéine cible sur la croissance des neurites.

Déclarations de divulgation

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Couvercles circulaires de 18 mmThermo ScientificCB00180RAStériliser avant utilisation
Cytochalasine DInvitrogenPHZ1063Dissous dans DMSO
EndoFree Plasmid Maxi KitQIAGENRéférence 12362
Milieu de montage par fluorescenceDakoS302380
Réactif de transfection Lipofectamine 2000Invitrogen11668019
paraformaldéhydeSigma-AldrichRéf. P6148
pEGFP-C1ClontechRéf. 6084-1
pCI FE65Veuillez consulter les références 8 et 15
Comprimés PBSGibco18912014
Pénicilline-streptomycineGibco15140122
Bromhydrate de poly-D-lysineSigma-AldrichP7280
spatuleSigma-AldrichRéf. S4147
Trypsine-EDTA (0,05 %), rouge de phénolGibco25300062

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Mots-clés

Neurones corticaux primairestransfection l EGFPanalyse de la prot ine ciblemicroscopie fluorescenceImageJ NeuronJfixation au paraformald hyderev tement la poly D lysinemesure des projections neuronales

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