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Technologie d’interférométrie de biocouche pour détecter les interactions entre le ligand et l’analyte

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source : Desai, M., et al. Application de l’interférométrie de biocouche (BLI) pour l’étude des interactions protéine-protéine dans la transcription. J. Vis. Exp. (2019)

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration de la technologie d’interférométrie de biocouche (BLI) pour détecter les interactions intermoléculaires entre les ligands et les analytes cibles en temps réel. BLI mesure les changements dans le modèle d’interférence de la lumière blanche réfléchie par une couche de ligands immobilisés à la surface d’un biocapteur lorsqu’ils interagissent avec des analytes en solution.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Configuration de l’hydratation et du dosage des biocapteurs

  1. Allumez la machine BLItz.
  2. Assurez-vous que la machine est connectée à l’ordinateur via un port de sortie de données USB à l’arrière de la machine.
  3. Sur l’ordinateur, ouvrez le logiciel associé (par exemple, BLItz Pro) et cliquez sur Cinétique avancée sur le côté gauche de l’écran.
  4. Sur le logiciel, tapez toutes les informations appropriées sur l’expérience (y compris le nom de l’expérience, la description, l’ID de l’échantillon et la concentration en protéines) sous chaque en-tête respectif.
  5. Cliquez sur Type de biocapteur e....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Machine BLItzForteBio45 à 5000appareil
Trempage et lecture du plateau du biocapteur Ni-NTAForteBioRéférence 18-5101Biocapteurs Ni-NTA prêts à l’emploi pour protéines poly-His-marquées
Support de chuteForteBio45-5004appareil
Tubes PCR (0,2 mL)Thomas ScientificCLS6571Articles en plastique
Tubes de microcentrifugation (noirs)Thermo Fisher ScientificTél. : 03-391-166Articles en plastique
Lingettes KimwipesThermo Fisher Scientific06-666AArticles en plastique
La TNTThermo Fisher ScientificRéf. R0861chimique
EdtaMilliporeSigmaE6758chimique
MgCl2MilliporeSigmaRéférence M8266chimique
NaClMilliporeSigmaRéf. S9888chimique
Tris-HClOrBiographieT095100tampon

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Biolayer InterferometryLigand Analyte InteractionNi NTA BiosensorHistidine Tagged LigandWavelength Shift MeasurementAssociation Dissociation KineticsBLI Buffer SystemFiber Optic BiosensorBLItz InstrumentAdvanced Kinetics Software

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