Article de méthode

Spectroscopie de corrélation diffuse pour évaluer le flux sanguin cérébral dans un modèle murin

8 juillet 2025

Dans cet article

Résumé

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Source : Brothers, R. O., et al. systèmes de la réponse neuroinflammatoire et hémodynamique aux lésions cérébrales traumatiques. J. Vis. Exp. (2022)

Dans cette vidéo, nous démontrons la technique de spectroscopie de corrélation diffuse pour mesurer le débit sanguin cérébral dans un modèle murin de lésion cérébrale traumatique légère.

Protocole

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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE

1. Évaluation du débit sanguin cérébral par spectroscopie de corrélation diffuse

  1. Acquisition de données DCS
    1. Épilez les cheveux sur le cuir chevelu. Parce que l’ADD fonctionne mieux en l’absence de cheveux, il est nécessaire d’enlever la fourrure sur la tête avant le début des expériences. En règle générale, l’épilation est effectuée 1 à 3 jours avant le début de l’étude.
      1. Induisez les souris avec 4,5 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène pendant 45 secondes et maintenez avec 1 à 2 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène.
      2. Rasez la tête entre les yeux et les oreilles. Ensuite, utilisez une crème dépilatoire pour enlever la fourrure sur la tête comme sur la figure 1.
      3. Laissez l’animal se remettre de l’anesthésie sur un coussin chauffant, puis retournez dans la cage.
    2. Mesurez le débit sanguin cérébral avec DCS. Pour minimiser les artefacts de mouvement pendant la mesure, étudiez des souris sous une brève anesthésie à l’isoflurane.
      note: Surveillez visuellement la respiration et la réponse par pincement des orteils tout au long des mesures et ajustez la concentration d’isoflurane si nécessaire pour assurer une profondeur d’anesthésie constante. Des variations significatives de la profondeur de l’anesthésie pourraient modifier le flux sanguin compte tenu des effets vasomodulateurs connus de l’isoflurane.
      1. Induisez avec 4,5 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène pendant 45 secondes, puis maintenez avec 1,0 à 1,75 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène. Confirmer une profondeur d’anesthésie suffisante par l’absence de réponse de pincement des orteils et une respiration normale (entre ~60 et 80 respirations par minute).
      2. Après une période de stabilisation de 2 minutes, posez doucement le capteur DCS sur l’hémisphère droit de sorte que le bord supérieur du capteur optique s’aligne avec l’arrière de l’œil et que le côté du capteur s’aligne le long de la ligne médiane (Figure 1). Placez une main sur le capteur pour le protéger de la lumière ambiante. Acquisition de 5 secondes de données (acquisition 1 Hz).
      3. Repositionnez le capteur sur l’hémisphère gauche et acquérez 5 secondes de données.
      4. Répéter l’opération 3 fois/hémisphère pour tenir compte des hétérogénéités locales sous la surface du tissu.
    3. récupération
      1. Retirez la souris de l’anesthésie et placez-la sur un coussin chauffant.
      2. Une fois que la souris a retrouvé son réflexe de redressement, renvoyez-la dans la cage.

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Résultats

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Figure 1 : Mesure du débit sanguin cérébral par spectroscopie de corrélation diffuse. (A) Un capteur optique est doucement maintenu manuellement sur l’hémisphère droit pour mesurer le débit sanguin chez une souris anesthésiée. (B) Placement représentatif du capteur sur l’hémisphère droit. Le contour du capteur est représenté par un rectangle noir en pointillés, et l’emplacemen...

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Déclarations de divulgation

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Aucun conflit d’intérêts n’a été déclaré.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Crème dépilatoireamazoneNdayisaba
DiH2OVWRVWRL0200-1000
Carte d’autocorrélation matériellewww.correlator.comFlex05-8ch
Isoflurane 250 mLMED-VET INTERNATIONALRXISO-250
Kimwipe (11,2 x 21,3 cm)VWRRéférence 21905-026
Mélangeur vortex de laboratoireVWRRéférence 10153-838
LabViewNational InstrumentsLabVIEW
Luminex 200, HTS, FLEXMAP 3D ou MAGPIX avec le logiciel xPONENTSociété Luminex
Langage de programmation R
RStudiowww.rstudio.com
Sonicateur
Tube de guidage en acrylique de 1 mMcMaster-CarrRéf. 49035K85
Photodiode d’avalanche à 4 comptages de photonsPerkin-ElmerSPCM-AQ4C-IO
Fibre source multimode 400 umThorlabs Inc.FT-400-EMT
Boulon de 54 gQuincaillerie AceDiamètre de base du corps de 0,95 cm, diamètre de la tête de 2 cm, longueur de 10,2 cm
Détecteur monomode 780 nm fibreThorlabs Inc.780 ch
Laser à longue cohérence de 852 nmTOPTICA PhotoniqueiBeam intelligent

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Mots-clés

Traumatisme cranio enc phaliqueLumi re proche infrarougePhotodiode avalancheAutocorr lateurIndice de d bit sanguin c r bralPlacement du capteur optiqueAcquisition de donn es

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