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Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE
1. Évaluation du débit sanguin cérébral par spectroscopie de corrélation diffuse
- Acquisition de données DCS
- Épilez les cheveux sur le cuir chevelu. Parce que l’ADD fonctionne mieux en l’absence de cheveux, il est nécessaire d’enlever la fourrure sur la tête avant le début des expériences. En règle générale, l’épilation est effectuée 1 à 3 jours avant le début de l’étude.
- Induisez les souris avec 4,5 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène pendant 45 secondes et maintenez avec 1 à 2 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène.
- Rasez la tête entre les yeux et les oreilles. Ensuite, utilisez une crème dépilatoire pour enlever la fourrure sur la tête comme sur la figure 1.
- Laissez l’animal se remettre de l’anesthésie sur un coussin chauffant, puis retournez dans la cage.
- Mesurez le débit sanguin cérébral avec DCS. Pour minimiser les artefacts de mouvement pendant la mesure, étudiez des souris sous une brève anesthésie à l’isoflurane.
note: Surveillez visuellement la respiration et la réponse par pincement des orteils tout au long des mesures et ajustez la concentration d’isoflurane si nécessaire pour assurer une profondeur d’anesthésie constante. Des variations significatives de la profondeur de l’anesthésie pourraient modifier le flux sanguin compte tenu des effets vasomodulateurs connus de l’isoflurane.
- Induisez avec 4,5 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène pendant 45 secondes, puis maintenez avec 1,0 à 1,75 % d’isoflurane dans 100 % d’oxygène. Confirmer une profondeur d’anesthésie suffisante par l’absence de réponse de pincement des orteils et une respiration normale (entre ~60 et 80 respirations par minute).
- Après une période de stabilisation de 2 minutes, posez doucement le capteur DCS sur l’hémisphère droit de sorte que le bord supérieur du capteur optique s’aligne avec l’arrière de l’œil et que le côté du capteur s’aligne le long de la ligne médiane (Figure 1). Placez une main sur le capteur pour le protéger de la lumière ambiante. Acquisition de 5 secondes de données (acquisition 1 Hz).
- Repositionnez le capteur sur l’hémisphère gauche et acquérez 5 secondes de données.
- Répéter l’opération 3 fois/hémisphère pour tenir compte des hétérogénéités locales sous la surface du tissu.
- récupération
- Retirez la souris de l’anesthésie et placez-la sur un coussin chauffant.
- Une fois que la souris a retrouvé son réflexe de redressement, renvoyez-la dans la cage.