Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.
1. Induction de l’inflammation cutanée chez les souris pIL1-DsRed
- Anesthésier la souris par injection intrapéritonéale (i.p.) d’un cocktail anesthésique contenant 100 mg/kg de kétamine, 10 mg/kg de xylazine et 1 mg/kg d’acépromazine. Les souris correctement anesthésiées ne montrent pas de retrait de la patte arrière pour pincer les orteils.
- Appliquez de la crème dépilatoire sur la surface dorsale des deux oreilles de la souris. Attendre 30 sec à 1 min. Essuyez la surface de l’oreille avec du coton mouillé à l’eau et laissez sécher à l’air.
- Mesurez l’épaisseur de l’oreille à l’aide d’un micromètre et placez la souris dans une cage séparée. Observer jusqu’à récupération de l’anesthésie (~ 15 - 30 min). Pour résoudre l’inflammation cutanée induite par le produit d’épilation, laissez la souris se reposer pendant 3 jours avant de poursuivre l’expérimentation
.
- Préparez 1,25 % (p/v) d’oxazolone (OX) en dissolvant 16,7 mg d’OX dans 1 ml d’acétone et en mélangeant 750 μl de solution d’OX/acétone avec 250 μl d’huile d’olive. Préparez la solution du véhicule en mélangeant 750 μl d’acétone avec 250 μl d’huile d’olive.
- Ré-anesthésie de la souris par injection intrapéritonéale (i.p.) d’un cocktail anesthésique (1.1). Mesurez l’épaisseur de l’oreille comme précédemment.
- Appliquez 12,5 μl d’OX à 1,25 % de chaque côté de l’oreille droite. Appliquez 12,5 μl de solution de véhicule d’acétone/huile d’olive de chaque côté de l’oreille gauche.
- Gardez la souris à l’écart de ses compagnons de cage jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie pour éviter qu’elle ne soit blessée par d’autres souris, puis replacez la souris dans sa cage d’origine et retournez-la à l’animalerie.
note: L’épilation peut entraîner une inflammation mineure de la peau suivie d’un changement de l’épaisseur de l’oreille. Cette inflammation mineure sera résolue 3 jours plus tard, confirmée par une épaisseur normale de l’oreille. Après une application topique pendant 24 heures, les oreilles traitées à l’OX présentent un gonflement significatif (p < 0,01) par rapport aux oreilles traitées en solution de véhicule seule.
