Réponse immunitaire

Cette vidéo présente l’imagerie in vivo permettant d’étudier la dynamique de recrutement des neutrophiles sur un site d’infection chez une souris transgénique immunodéprimée avec des neutrophiles exprimant la GFP. Il s’agit d’injecter des bactéries luminescentes pour provoquer une infection. Cela conduit au recrutement de neutrophiles sur le site de l’infection, dont le suivi se fait par imagerie.

Dans cette vidéo, nous démontrons l’activation des macrophages dérivés de la moelle osseuse en réponse au lipopolysaccharide bactérien et à l’immunoglobuline intraveineuse.

Cette vidéo démontre l'activation des macrophages péritonéaux d'une souris à l'aide d'immunoglobulines intraveineuses et de lipopolysaccharides bactériens. La co-stimulation active les macrophages péritonéaux en macrophages anti-inflammatoires possédant une activité régulatrice immunitaire.

Cette vidéo présente une technique ex vivo pour induire la mort des cellules cérébrales médiée par les lymphocytes T CD8+ cytotoxiques. Lors de l’obtention de coupes cérébrales, des lymphocytes T CD8+ activés dirigés contre les oligodendrocytes sont transférés sur les tranches pour cibler la gaine de myéline et les oligodendrocytes. Après l’incubation, les dommages à la myéline et la mort neuronale peuvent être évalués histologiquement dans les régions d’intérêt.

Dans cette vidéo, nous décrivons un protocole pour tester l’efficacité d’un vaccin acellulaire contre la coqueluche contre l’infection à Bordetella pertussis chez la souris. Après la vaccination, les souris ont été soumises à une infection et leur homogénat de tissu a été cultivé pour analyser les colonies bactériennes afin de déterminer l’immunité protectrice induite par le vaccin.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode pour étudier la dynamique des organites dans les lymphocytes B suite à leur activation avec des microbilles enrobées d’antigène.

Cette vidéo démontre l’activation des lymphocytes B in vitro. Le processus implique une interaction de l’antigène avec les récepteurs des lymphocytes B, conduisant au remodelage du cytosquelette, à la formation de synapses immunitaires, au mouvement des lysosomes, à l’internalisation de l’antigène, au traitement et à la présentation ultérieure sur les molécules du CMH pour l’activation des lymphocytes B.

Cette vidéo présente une technique permettant de générer un modèle murin de colite induit par des produits chimiques, une maladie inflammatoire de l’intestin. La souris est autorisée à consommer une solution de sulfate de sodium de dextran (DSS) pendant une durée adéquate. Lors de la consommation, le DSS endommage la barrière de mucus et de la couche épithéliale dans le côlon, permettant aux microbes intestinaux de pénétrer dans les tissus sous-jacents - où ils sont détectés par les cellules...

Dans cette vidéo, nous démontrons l’effet de différentes concentrations d’anticorps anti-c-fms sur l’ostéoclastogenèse, qui est le processus de formation des ostéoclastes à partir des progéniteurs des ostéoclastes.

Cette vidéo démontre la quantification des médiateurs inflammatoires au cours de l’infection en incubant des cellules immunitaires dérivées de tissus pulmonaires humains avec Haemophilus influenzae. La cytométrie en flux est utilisée pour mesurer la fluorescence des cytokines dans les lymphocytes marqués, en corrélation avec la production de cytokines pro-inflammatoires en réponse à une infection bactérienne.

Dans cette vidéo, nous faisons la démonstration d’un test de chimiluminescence in vitro pour détecter la génération d’espèces réactives de l’oxygène par les neutrophiles lors de l’exposition à un biofilm bactérien opsonisé.

Cette vidéo présente un test in vitro pour étudier l’interaction neutrophile-biofilm. Les bactéries pathogènes intégrées dans le biofilm et les neutrophiles isolés ont été marqués à l’aide de marqueurs fluorescents, et la réponse immunitaire des neutrophiles et l’évasion de la réponse immunitaire par les bactéries ont été évaluées à l’aide d’un microscope à fluorescence.

Cette vidéo présente une méthode pour détecter l’activation de l’inflammasome NLRP3 dans les macrophages à l’aide de sondes rapporteures fluorescentes. Les cellules sont traitées avec des ionophores de potassium et de la glycine pour induire l’assemblage de l’inflammasome et l’activation de la caspase-1. Les sondes rapporteures fluorescentes visualisent la caspase-1 activée, et les cellules sont colorées avec un colorant fluorescent pour la visualisation des noyaux.

Cette vidéo présente une technique permettant d’étudier la formation d’inflammasomes NLRP3 (Pyrin Domain-containing 3) de type récepteur NOD dans les macrophages primaires par immunofluorescence. Les macrophages sont d’abord amorcés avec du lipopolysaccharide bactérien (LPS) pour réguler à la hausse l’expression de la protéine NLRP3. L’exposition des macrophages à la nigéricine – un ionophore de potassium – conduit à l’activation de NLRP3 et à la formation d’inflammasomes, qui sont visualisés...

Cette vidéo montre le dosage de la lactate déshydrogénase pour détecter la mort des macrophages médiée par l’inflammasome. Les macrophages sont exposés au lipopolysaccharide pour l’amorçage, suivi d’une exposition à la nigéricine pour provoquer la mort cellulaire induite par l’inflammasome, qui est déterminée par le dosage de la lactate déshydrogénase.

Cette vidéo montre l’induction et la visualisation de pièges extracellulaires de neutrophiles ou TNE dans des neutrophiles pré-marqués à l’aide de sérum de patient contenant des anticorps cytoplasmiques anti-neutrophiles. De plus, l’utilisation d’un colorant d’ADN imperméable et la microscopie à fluorescence permettent de visualiser les TNE.

Cette vidéo démontre l’isolement lipidique des neutrophiles humains par un système de solvant biphasique utilisant du méthanol et du chloroforme.

Dans cette vidéo, nous démontrons un test de cytotoxicité pour évaluer l’infection à Cryptococcus neoformans, un champignon pathogène, dans les macrophages. La cytotoxicité est déterminée par la libération de l’enzyme cytoplasmique lactate déshydrogénase due à la lyse des macrophages causée par l’infection à Cryptococcus neoformans.

Cette vidéo présente un système d’infection basé sur un insert de membrane perméable pour évaluer l’impact des toxines bactériennes sécrétées. En éliminant le contact direct entre la bactérie pathogène et les cellules hôtes à l’aide d’une membrane perméable, cette technique permet d’étudier l’effet des toxines sécrétées par les bactéries pathogènes sur les cellules hôtes des mammifères.

Cette vidéo présente un système d’insertion de membrane perméable permettant d’étudier l’impact des toxines bactériennes sur les cellules hôtes de manière contrôlée et isolée. Cette approche permet l’exposition sélective des cellules aux toxines tout en maintenant une séparation physique qui imite l’interaction naturelle hôte-pathogène.

Cette vidéo montre le test d’adhérence bactérienne pour évaluer l’adhérence bactérienne marquée GFP à la culture de cellules épithéliales afin d’étudier la dynamique des interactions hôte-pathogène à l’aide de l’imagerie basée sur la microscopie à fluorescence.

Cette vidéo présente une technique de détection de la réponse locale et globale des ions calcium lors de l’infection à Shigella des cellules épithéliales humaines. Shigella envahit les cellules hôtes et libère des effecteurs d’invasion, ce qui a un impact sur les niveaux de calcium intracellulaire. L’amplitude et la fréquence du calcium cytosolique local et global sont étudiées à l’aide d’un indicateur fluorescent.

Cette vidéo analyse la formation des synapses immunitaires entre les lymphocytes T dans des préparations pan-leucocytaires non purifiées et les cellules Raji chargées de Staphylococcus aureus enterotoxine B, chargées de SEB. L’enrichissement en CD3 et en F-actine est observé dans la synapse immunitaire à l’aide de la cytométrie en flux d’imagerie.

Cette vidéo présente un test pour étudier la régulation de la phagocytose des macrophages par cellules souches mésenchymateuses (CSM) dans une co-culture. Lors de la co-culture de CSM avec des macrophages, des particules zymosanes non opsonisées conjuguées à un fluorophore sensible au pH sont ajoutées pour être phagocytées par les macrophages. Avec l’augmentation de la phagocytose, l’intensité de la fluorescence augmente, ce qui permet de déterminer la régulation de l’activité phagocytaire par...

Dans cette vidéo, nous démontrons l’administration intracisternale de Neisseria meningitidis dans un modèle murin pour générer une infection par méningite.

Dans cette vidéo, nous décrivons une méthode pour identifier les inhibiteurs de kinases à petites molécules qui modulent l’apoptose des thymocytes immatures doublement positifs CD4+CD8+ auto-réactifs. L’apoptose est induite dans les thymocytes doublement positifs en les activant avec des billes magnétiques enrobées d’anti-CD3 et d’anti-CD28 ; Ceci est suivi d’un traitement par inhibiteur de petites molécules et d’une analyse par cytométrie en flux pour détecter si les inhibiteurs modulent...

Dans cette vidéo, nous décrivons une procédure permettant d’effectuer une nano-injection d’un virus à ARN simple brin de sens positif chez des mouches drosophiles mâles adultes, puis d’étudier les réponses antivirales initiées en raison de l’infection. L’analyse de l’amplification en chaîne par polymérase identifie la régulation positive de gènes spécifiques chez les mouches infectées qui indiquent l’activation des voies de réponse immunitaire, y compris l’interférence ARN et la signalisation...

Cette vidéo présente la méthode de coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E) pour évaluer les lésions du côlon dans un modèle murin de colite induite par le DSS - une maladie inflammatoire de l’intestin. Lors de l’isolement du côlon d’une souris traitée au DSS et de l’obtention de sections du tissu, la coloration H&E des sections aide à identifier les lésions tissulaires induites par l’inflammation.

Dans cette vidéo, nous décrivons la méthodologie de mise en place d’un système de culture d’organes intestinaux ex vivo pour étudier les interactions entre des fragments de tissu intestinal de souris et des bactéries intestinales spécifiques. Le dispositif se compose de deux paires de ports d'entrée-sortie, le premier connectant la lumière du tissu intestinal et y fournissant la suspension bactérienne spécifique, et le second fournissant en permanence des fluides aux puits du dispositif pour...

Cette vidéo présente une technique in vitro pour étudier l’impact du traitement antimicrobien sur les agrégats de Pseudomonas aeruginosa (Pa). Les cellules Pa marquées par fluorescence sont cultivées sous forme d’agrégats, imitant le modèle de croissance pendant l’infection. Après avoir testé les agrégats avec une concentration sublétale de colistine, l’évaluation en temps réel de l’interaction bactérie-antibiotique est effectuée par microscopie à fluorescence.

Cette vidéo présente une technique de quantification in vitro pour déterminer l’infection des macrophages par Listeria monocytogenes par le test d’unité formant colonie. Les colonies bactériennes sur la plaque de gélose représentent la population bactérienne intracellulaire qui échappe au mécanisme de défense de l’hôte et survit dans les macrophages.

Dans cette vidéo, nous quantifions Listeria monocytogenes intracellulaire et extracellulaire, une bactérie pathogène intracellulaire, suite à l’infection de macrophages cultivés in vitro à l’aide de la cytométrie en flux.

Cette vidéo démontre la nano-injection de suspension bactérienne dans la cavité du corps de la mouche, entraînant une multiplication bactérienne et une infection. La réponse immunitaire de la mouche élimine certaines bactéries, tandis que d'autres échappent à l'élimination immunitaire et survivent à l'intérieur de l'hôte, provoquant une infection.

Cette vidéo montre une technique pour infecter la drosophile en introduisant une bactérie pathogène directement dans sa cavité corporelle. Cette méthode contourne les barrières épithéliales et d’autres mécanismes de défense passive, permettant l’induction d’une infection systémique. Au moment de l’infection, la réponse immunitaire qui en résulte est évaluée en surveillant la mortalité des mouches et en effectuant des tests en aval.

Dans cette vidéo, nous démontrons une technique de mesure de la charge bactérienne d’E. coli après l’injection d’E. coli dans le thorax de Drosophila melanogaster.

Dans cette vidéo, nous démontrons le test d’effet cytopathique pour déterminer la dose virale infectieuse du virus de la drosophile C sur les cellules de la drosophile S2* de culture tissulaire. Une gamme de concentrations virales est utilisée pour infecter les cellules cultivées. La proportion de cellules présentant des changements structurels est déterminée, et ces données sont utilisées pour calculer la dose infectieuse de culture tissulaire.

Cette vidéo présente une méthode pour induire une inflammation de la surface oculaire et un dysfonctionnement de la glande de Meibomius dans un modèle murin. La stimulation du système immunitaire de la souris à l'aide d'un immunogène et la restimulation ultérieure avec le même immunogène favorisent l'inflammation de la surface oculaire, ce qui provoque l'obstruction de la sécrétion de la glande de Meibomius par les aggNET produites par les neutrophiles et conduit à la sécheresse oculaire.

Cette vidéo démontre l’activation des protéines caspase dans les macrophages humains à l’aide de protéines rapporteures de complémentation de fluorescence bimoléculaire. Les pro-domaines de la caspase-1 sont fusionnés avec des fragments non fluorescents de protéines de Vénus, qui sont recrutés dans des complexes d’inflammasome. La proximité des inflammasomes induit le repliement et la fluorescence des fragments de Vénus, confirmant l’activation des caspases dans les macrophages.

Cette vidéo démontre l’effet des préparations de produits du tabac, les TPP, sur la production de cytokines à partir de cellules mononucléées du sang périphérique humain à l’aide de la cytométrie en flux. Le traitement des cellules avec le TPP régule à la baisse la production de cytokines pro-inflammatoires, qui est estimée après stimulation par lipopolysaccharides, suivie d’une immunocoloration et d’une analyse par cytométrie en flux.

Dans cette vidéo, nous démontrons la préparation d’un biofilm in vitro par S. aureus dans une plaque multipuits recouverte de poly-L-Lysine. La plaque formée d’un biofilm peut être utilisée pour des expériences en aval.

Cette vidéo présente une technique in vitro pour stimuler les lymphocytes via Haemophilus influenzae non typable (NTHi) et pour évaluer la réponse immunitaire. L’incubation de cellules mononucléées isolées du sang périphérique (PBMC) avec NTHi amène les cellules bactériennes à stimuler les lymphocytes T, ce qui entraîne la production de cytokines. Lors de l’inhibition de la sécrétion de cytokines, une coloration par immunofluorescence est effectuée pour détecter les cytokines intracellulaires...

Cette vidéo démontre l’évaluation de la colite induite par des produits chimiques par coloration immunohistochimique du tissu du côlon de souris. Dans une coupe de tissu coloré, la présence d’un grand nombre de cellules immunitaires dans le tissu endommagé représente l’infiltration de cellules immunitaires pendant la colite.

Dans cette vidéo, nous étudions l’effet d’un milieu entier conditionné par la fumée, une préparation de produit du tabac combustible, sur la destruction des cellules K562 par les cellules mononucléées du sang périphérique effecteur.

Cette vidéo présente une technique in vivo permettant d’évaluer un antigène de test en induisant une inflammation cutanée dans un modèle murin. L’antigène du test – un haptène dans une solution huile/acétone – est appliqué localement sur la peau de l’oreille de la souris, et l’inflammation de la peau est évaluée après une période adéquate.

Cette vidéo montre une procédure de biopsie à l’emporte-pièce pour créer une plaie précise dans un modèle murin. L’excision expose la couche sous-cutanée de la peau, fournissant un site approprié pour l’étude des réponses immunitaires à l’infection pathogène localisée.