Technique de génération d’un modèle murin d’arthrite induite par un adjuvant

Résumé

Source : Lu, Q., et al. Détection de la migration et de l’infiltration des neutrophiles chez la souris. J. Vis. Exp. (2020).

Cette vidéo montre une méthode pour générer de l’arthrite induite par l’adjuvant dans un modèle murin. L'adjuvant de Freund complet (CFA) est injecté dans l'articulation de la cheville de la souris et les zones périarticulaires. L’AFC active le système immunitaire, entraînant une infiltration de neutrophiles et une inflammation exagérée.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Induction du modèle murin d’arthrite induite par l’adjuvant (AA)

1. Suspendre l'adjuvant de Freund complet (CFA) en tourbillonnant pendant au moins 5 s, puis aspirer 100 μL de suspension dans un injecteur d'insuline.
   note: Nous recommandons d’utiliser un CFA entièrement nouveau dans les expériences pour garantir la stérilité.
2. Anesthésie les souris comme décrit.
3. Marquez la patte choisie et injectez 20 μL de CFA dans l’espace articulaire de la cheville. Injecter 20 μL de suspension dans quatre points périarticulaires sur la patte choisie (80 μL au total).
4. Retirez les souris de l’unité respiratoire et placez-les dans une nouvelle chambre. Surveillez les souris pour vous assurer qu’elles respirent jusqu’à ce qu’elles retrouvent la capacité de bouger.
5. Tous les 3 jours, évaluez le diamètre de l’articulation en mesurant le diamètre de l’articulation de la cheville à l’aide d’un mesureur d’épaisseur de poche (Figure 1A).
6. Tous les 3 jours, évaluer la gravité de l’arthrite en fonction d’un critère de cotation de l’arthrite (figure 1C) : 0, normal, aucun signe d’érythème et d’enflure ; 1, arthrite, érythème et gonflement légers le plus léger limités aux tarses ou à l’articulation de la cheville ; 2, arthrite modérée, érythème et enflure légère s’étendant de la cheville aux tarses ; 3, arthrite sévère, érythème et enflure modérée s’étendant de la cheville aux articulations métatarsiennes ; 4, L’arthrite, l’érythème et l’enflure les plus graves englobent la cheville, le pied et les doigts, ou l’ankylose du membre.

Résultats

Figure 1 : Résultats représentatifs du modèle murin de l’arthrite induite par l’adjuvant (AA). (A) Le diamètre de l’articulation de la cheville a été mesuré à l’aide d’une jauge d’épaisseur de poche. (B) L’enflure articulaire a été évaluée en fonction du diamètre de l’articulation de la cheville (n = 7). (C) Des photos de chaque score d’arthri...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Tube à centrifuger conique en polypropylène de 15 mL	Faucon	Référence 14-959-53A
Aiguille de 23 g x 1 1/4 po	Bd	Référence 305120
Aiguille de 26 g x 3/8 po	Bd	Référence 305110
Aiguille de 30 g x 1/2 po	Bd	305106
Adjuvant complet de Freund, 10 mg/ml	sigma	1002036152
Microtubes Eppendorf, 1,5 mL	sigma	Z606340
Jauge d’épaisseur de cadran	Mitutoyo	Référence 7301
Shu Rui U40 Aiguille d’injection d’insuline stérile jetable 1 mL	Bd	328421