Canulation de l’artère carotide chez un modèle de rat

Résumé

Source : Trevaskis, N. L. et al., Le modèle de rat canulé du canal lymphatique mésentérique : application à l’évaluation du transport lymphatique intestinal des médicaments. J. Vis. Exp. (2015)

Dans cette vidéo, nous montrons une procédure chirurgicale pour canuler l’artère carotide gauche dans un modèle de rat.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Canulation de l’artère carotide

La canulation de l’artère carotide peut être réalisée avant ou après la canulation du canal lymphatique mésentérique. Certains opérateurs préfèrent canuler l’artère carotide avant de canuler le canal lymphatique afin de réduire le risque de délogement de la canule lymphatique lors du déplacement de l’animal.

1. Placez une marque sur la canule de l’artère carotide à 2,5 cm de l’extrémité du biseau pour identifier la partie du tube à insérer dans l’artère. Connectez l’autre extrémité de la canule (c’est-à-dire sans biseau) à une aiguille de 23 ou 25 G attachée à une seringue remplie de solution anticoagulante et remplissez la canule avec la solution anticoagulante en vous assurant qu’il n’y a pas d’espace d’air.
2. Pour faciliter la canulation, placez le rat anesthésié en position couchée dorsale, le cou tendu et la tête pointée vers l’opérateur. Notez que certains opérateurs préfèrent effectuer cette technique avec la queue du rat pointée vers l'opérateur.
3. Placez une incision longitudinale de 1 à 1,5 cm à travers la couche cutanée au-dessus de la gauche de la trachée dans le plan sagittal.
4. Disséquez le tissu conjonctif sous-cutané à l’aide d’une pince à pointe émoussée pour exposer les muscles sous-jacents du cou.
5. Rétractez les muscles du cou pour révéler l’artère carotide gauche (située à ~1 cm sous la surface de la peau et pulsée). Nettoyez le tissu conjonctif sus-jacent de l’artère par dissection émoussée.
6. Isolez soigneusement une section de ~1 cm de l’artère à l’aide d’une pince à tissu contondant, en prenant soin de ne pas endommager le tractus nerveux vagal adjacent. Pour ce faire, ouvrez et fermez la pince à pointe émoussée verticalement de chaque côté de l’artère pour la libérer des tissus environnants et du nerf vague.
7. À l’aide d’une pince à pointe fine, enfilez deux sutures en soie sous l’artère carotide et placez-les à chaque extrémité de la section de l’artère isolée. Attachez la suture la plus proche de l'opérateur et la plus éloignée du cœur et de la clavicule du rat (Figure 1A).
8. Obstruez le flux sanguin dans l’artère en plaçant une paire de pinces droites à pointe fine sous l’artère (Figure 1B).
9. À l’aide des ciseaux à iris à pointe fine, placez une petite incision sur la surface supérieure de l’artère (environ 1/3 de la hauteur du haut de la zone isolée). Rincez tout sang renversé à la surface de l’artère avec une solution saline héparinée et essuyez doucement à l’aide d’embouts en coton.
10. Insérez l’extrémité de la canule dans l’artère à l’aide d’une paire de pinces à pointe incurvées. Une fois insérée, retirez la pince droite à pointe fine qui obstrue le flux sanguin et avancez la canule de 2,5 cm dans l’artère à l’aide de deux paires de pinces, l’une pour maintenir la canule à l’intérieur de l’artère afin d’empêcher le sang de s’écouler et l’autre pour insérer la canule.
11. Utilisez une petite pince artérielle pour maintenir la canule à l’intérieur de l’artère et retirez la pince droite à pointe fine qui a été placée sous l’artère à l’étape 1.8 pour obstruer le flux sanguin.
12. Confirmez la perméabilité de la canule en injectant une solution anticoagulante dans la canule et en prélevant une petite quantité de sang (figure 1C). Rincez ensuite la canule avec une solution anticoagulante et scellez l’extrémité à l’aide de la flamme d’un briquet ou d’un bouchon de canule.
13. Attachez la canule en place avec les deux sutures placées sous l’artère à l’étape 1.8.
14. Retirez la pince artérielle et fixez une troisième suture autour de l’artère et de la canule. Fermez la plaie du cou avec des sutures.

Résultats

Graphique 1. Photographies de (A) l’artère carotide isolée à l’aide de deux sutures en soie avec celle la plus proche de l’opérateur attachée, (B) l’artère carotide isolée et le flux sanguin occlus à l’aide d’une paire de pinces droites à pointe fine placées sous l’artère, et (C) une artère carotide avec la canule en place et la perméabilité v...

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Solution saline stérile	Baxter Soins de santé	AHB 1307	N’importe quelle marque peut être utilisée. Exemple ici : sacs salins Baxter 100 ml, boîte de 50
70 % d’éthanol dans l’eau	quelconque		Toutes les marques peuvent être utilisées
Héparine (35000I.U. dans 35 mL)	Sigma Pharmaceuticals	Référence 337220	http://sigmaco.com.au/
Canule en polyéthylène (PE) d’un diamètre extérieur de 0,96 mm x d’un diamètre intérieur de 0,58 mm	Extensions de microtubes	PE8050	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est un tube PE 0,8 x 0,5 mm, 30 m
Canule en polyéthylène (PE) : d.E. 0,8 mm x d.i. 0,5 mm	Extensions de microtubes	PE9658	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est un tube PE 0,96 x 0,58 mm, 30 m
règle	quelconque		Toutes les marques peuvent être utilisées
Marqueurs	quelconque		Toutes les marques peuvent être utilisées
briquet	quelconque		Toutes les marques peuvent être utilisées
Aiguilles de calibre 23	Livingstone International	DN23GX0.75LV	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est l’aiguille jetable Livingstone, stérile, 23GX0.75inch, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT= 6&search=DN23GX0.75LV
Aiguilles de calibre 25	Livingstone International	DN25GX1.0LV	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est l’aiguille jetable Livingstone, stérile, 25GX1.0inch, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search= DN25GX1.0LV
Seringue de 1 ml	Livingstone International	T3SS01TA	N’importe quelle marque peut être utilisée. Exemple : seringue Terumo 1 ml Slip Tuberculin 100/boîte. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS01TA
Seringue de 10 ml	Livingstone International	T3SS10SA	N’importe quelle marque peut être utilisée. Exemple, ici : seringue Terumo 10 ml Slip 100/boîte. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS10SA
Tampons de gaze	Livingstone International	GSC075	N’importe quelle marque peut être utilisée et coupée à la taille requise. L’exemple ici est des cotons-tiges remplis de coton 7,5 x 7,5 cm, 8 plis. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =GSC075
Cotons-tiges	Livingstone International	CTAST075DP	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est l’applicateur en plastique Livingstone à double pointe. 75MM. 100/PQT. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =CTAST075DP
Suture en soie	Livingstone International	DTSK163019F4
Lames de scalpel	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 10020-00	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est la lame de scalpel FST #20. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=191
Manche de scalpel	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 10004-13	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est le manche de scalpel FST #4. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=298&CategoryId=51
1 x petits ciseaux chirurgicaux	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 14060-09	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est les ciseaux fins FST, 9 cm avec tranchant de 21 mm, tranchants, droits. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=40&CategoryId=17
2 x pince avec pointe incurvée dentelée	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 11001-13	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est une pince à motif standard FST 13 cm avec pointe incurvée de 2,8 x 1,4 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=405&CategoryId=32
1 x ciseaux d’iridectomie	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 15000-08	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est des ciseaux à ressort FST Vannas - Tranchant de 2,5 mm, droits. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=17&CategoryId=16
1 x pince à pointe dentelée droite	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 11650-10	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple est le FST Graefe 10 cm droit avec une pointe dentelée de 1 x 0,99 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=390&CategoryId=32
1 x pince à pointe fine lisse et tranchante	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 11251-10	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est la pince FST Dumont #5 droite 11cm avec pointe de 0,08 x 0,04mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=335&CategoryId=29
1 x pince avec pince fine et incurvée lisse	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 11063-07	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est la pince délicate FST 9 cm avec pointe lisse de 0,4 x 0,3 mm. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=360
1 x porte-aiguille de suture	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 12001-13	N’importe quelle marque peut être utilisée. Par exemple, il s’agit d’un porte-aiguille Hasley FST de 13 cm avec une pointe de 16 mm de longueur x 1,9 mm de largeur. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=254&CategoryId=70
1 x pince artérielle	Outils scientifiques fins (FST)	Référence 18050-28	N’importe quelle marque peut être utilisée. L’exemple ici est le FST Bulldog Serrefines droit, 28 mm de long, 9x1,6 mm de dimension de mâchoire avec une presse à pince moyenne. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=270&CategoryId=82