Imagerie par fluorescence enzymatique rapporteure pour le suivi in vivo d’une infection bactérienne

Résumé

Source : Sharan, R., et al. Imagerie de Mycobacterium tuberculosis chez la souris avec fluorescence enzymatique rapporteure. J. Vis. Exp. (2018).

Cette vidéo présente l’imagerie par fluorescence enzymatique rapporteure (REF) pour la détection in vivo de l’infection à Mycobacterium tuberculosis. Les souris infectées sont injectées par voie intrapéritonéale avec un substrat pour l’imagerie REF. Lorsqu’il est hydrolysé par l’enzyme bactérienne β-lactamase, le substrat émet une fluorescence dont la détection facilite l’évaluation de l’infection.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Souches et conditions de culture

Remarque : La souche CDC1551 de M. tuberculosis est utilisée dans cette étude, mais n’importe quelle souche de M. tuberculosis peut être utilisée de la même manière.

1. Cultivez les bactéries dans un milieu M-OADC-TW (bouillon 7H9 complété par 0,5 % de glycérol, 10 % de complexe de dextrose d’acide oléique sans catalase et 0,05 % de Tween-80) à 37 ....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
L’isoflurane	VETONE	501027
CNIR800	Synthétisé sur mesure
La solution Fatal Plus	Vortech Pharmaceutical Ls, Ltd
7H9 Bouillon Middlebrook	Bd	Référence 271310
Enrichissement de l’OADC Middlebrook	Bd	212351
Sporcidin		RE-1284F
7H11 Gélose Middlebrook	Bd	212203
Chambre Madison
Spectre IVIS	Perkin Elmer	124262
Système d’anesthésie à gaz XGI-8	Perkin Elmer
Logiciel d’imagerie vivante	Perkin Elmer
Cônes nasaux transparents	Perkin Elmer
Souche CDC1551 de M. tuberculosis	ATCC
Souris femelles BALB/C, 5-7 semaines	Laboratoire Jackson